لا يمكن إجراء التشخيص الصحيح بدون اختبارات أولية. تساعد المعلومات التي تم الحصول عليها الطبيب في التشخيص وتضمن وصف العلاج الصحيح. أحد الاختبارات المحددة هو الثقافة البكتيرية. يؤخذ من مواد بيولوجية مختلفة. في المقالة سننظر في جميع جوانب وميزات هذا الإجراء.

يُفهم البذر البكتريولوجي على أنه دراسة ميكروبيولوجية خاصة يتم إجراؤها في المختبر. يتم أخذ مادة بيولوجية كعينة اختبار، ويتم غربلتها عند درجة حرارة معينة. الغرض من هذه الدراسة: التعرف على وجود الكائنات الحية الدقيقة وتحديد عددها. في المستقبل، يصف الطبيب العلاج وفقا للبيانات الواردة.

يستخدم التحليل البكتريولوجي على نطاق واسع في طب الأورام وأمراض النساء وطب الأنف والأذن والحنجرة والجراحة والمسالك البولية وغيرها من المجالات.

مؤشر للدراسة البكتريولوجية هو وجود عملية التهابية في الأعضاء والأنظمة البشرية والاشتباه في الإنتان.

للبحث يمكن أخذ المواد البكتريولوجية التالية:

• البلغم.
• مخاط من الحلق.
• مخاط من مجرى البول.
• البول.
• الحيوانات المنوية.
• حليب الثدي.
• محتوى الكيس.
• السائل الشوكي.
• الصفراء.
• دم.
• إزالة المواد من الجرح.
• محتويات البؤر الالتهابية.
• مخاط من البلعوم الأنفي.

من كل مادة بيولوجية مدرجة، يتم زرع الكائنات الحية الدقيقة التالية:

1. يتم فحص المخاط من الجهاز البولي التناسلي بحثًا عن المكورات البنية، المشعرة، فطريات المبيضات، الميورة، فطريات النيسرية البنية، الميكوبلازما، فطريات المشعرة المهبلية، الليستيريا. سيتم أيضًا فحص حالة النباتات البكتيرية هنا.
2. يتم فحص الدم للتأكد من العقم.
3. يتم فحص مخاط البلعوم والأنف للتأكد من عدم وجود الليستيريا، المستدمية النزلية، العقدية الحالة للدم، المكورات السحائية، الوتدية الخناقية، المكورات الرئوية، المكورات العنقودية الذهبية.
4. يتم فحص إفرازات الجرح والمقصورات القيحية والوخز الحيوي بحثًا عن الزائفة الزنجارية والزائفة الزنجارية.
5. يتم فحص البراز بحثًا عن اليرسينيا والسالمونيلا وبكتيريا التيفوئيد والالتهابات المعوية الانتهازية والتسمم الغذائي. يتم فحص البراز أيضًا بحثًا عن دسباقتريوز الأمعاء.
6. مسحة، حليب الثدييتم فحص البول والكشط والصفراء والمني وسائل المفاصل بحثًا عن النباتات البكتيرية.

مزايا وعيوب البذر البكتيري

تشمل الجوانب الإيجابية للثقافة البكتيرية ما يلي:

• الطريقة تستبعد ردود الفعل الكاذبة.
• يسمح لك بالتحقق من أي سائل على الإطلاق.
• نتيجة الدراسة تسمح للطبيب بوصف العلاج المناسب.

الجانب السلبي يشمل:

• فترة طويلة جدًا من الدراسة.
• متطلبات عالية جداً للحصول على المادة المدروسة.
• متطلبات صارمة لمؤهلات الموظفين الذين يقومون الفحص البكتريولوجي.

كيف يتم جمع المواد البيولوجية

تعتمد جودة الدراسة بشكل كبير على صحة المادة الحيوية التي تم جمعها. لذلك، هناك قواعد صارمة بشأن السياج، والتي بدونها يستحيل الحصول على المعلومات الصحيحة عن حالة صحة الإنسان.

1. من الضروري جمع المادة بأدوات معقمة ووضع المادة المجمعة فقط في أطباق معقمة. إذا تم تجاهل ذلك، فإن جمع المواد وإجراء المزيد من البحث سيصبح بلا معنى.
2. من الضروري جمع المواد الحيوية بدقة قبل بدء العلاج بالمضادات الحيوية. وإلا فإن مساعد المختبر سوف يكشف عن بيانات خاطئة. إذا كان المريض يخضع بالفعل للعلاج بالمضادات الحيوية اليوم، فيجب إجراء الدراسات البكتريولوجية بعد 10 أيام فقط من انتهاء آخر حبة.
3. عند جمع البول، عليك أن تأخذ فقط الجزء الأوسط في الصباح. يجب وضع البول في وعاء معقم. يجب أن تكون كمية المادة المجمعة 10-15 مل. بالإضافة إلى ذلك، تأكد من محاولة توصيل البول إلى المختبر في أقل من ساعتين بعد جمعه.
4. قبل تجمع المخاط من الأنف أو الحلق، لا يمكنك الأكل والشرب وتنظيف أسنانك وشطف فمك بالمطهرات.
5. يجب أن يتم جمع البراز باستخدام ملعقة معقمة. وقت التجميع هو في الصباح. من الضروري طي المادة في وعاء معقم. يجب أن تكون كمية البراز المجمعة 15-30 جرامًا. يستغرق نقله إلى المستشفى أقل من 5 ساعات. لا يمكنك ترك البراز بين عشية وضحاها وتجميده.
6. يتم التعبير عن حليب الثدي فقط بعد إجراء النظافة. وللقيام بذلك يتم غسل منطقة الحلمتين والصدر جيداً بالماء، ثم معالجتها بمسحة من الكحول الإيثيلي بقوة 70%. بعد ذلك، يتم التعبير عن 15 مل من الحليب، والذي لا يستخدم للبحث. يتم صب الـ 5 مل التالية في وعاء معقم وإرسالها إلى المختبر. يجب تسليم المادة خلال ساعتين.
7. يتم أخذ الدم للفحص البكتريولوجي على خلفية درجة الحرارة. للأطفال مقداره 5 مل للبالغين - 15 مل. وهنا يجب ألا ننسى أن أخذ العينات لا يتم خلال فترة تناول المضادات الحيوية.
8. من الضروري جمع البلغم أثناء نوبة السعال التي بدأت. في هذه المرحلة، يتم إفراز المخاط من الحلق. يتم تسليم البلغم إلى المختبر خلال ساعة واحدة.
9. عند النساء، يتم جمع المادة بعد 14 يومًا من الدورة الشهرية، ويجب على النساء عدم التبول لمدة ساعتين، ويجب مرور شهر على الأقل بعد تناول المضادات الحيوية. عند جمع الحيوانات المنوية من الرجال، يجب عدم التبول لمدة 5-6 ساعات قبل إجراء التحليل.

ميزات التحليل البكتريولوجي

أي مواد تخضع للبحث. ولكل منهم خصائصه الخاصة في السلوك.

ثقافة الدم

في الحالة الطبيعية، لا يحتوي الدم على أي مسببات الأمراض. من المستحيل ببساطة تحديد وجودهم تحت المجهر. للتعرف على الكائنات الحية الدقيقة، يتم نشر البكتيريا أولاً في وسط سائل مغذٍ لها. ثم توضع عينات الدم في الظروف المهيأة لها (عند درجة حرارة 37 درجة مئوية) حتى يبدأ النمو المرئي. تستمر هذه العملية من 6 إلى 18 ساعة. إذا تم فحص البكتيريا التي تنمو لفترة طويلة جدًا، فسيتم الاحتفاظ بالدم في وسط غذائي لعدة أيام. عندما تصل البكتيريا إلى حجم معين، يمكن رؤيتها تحت المجهر. وفي المرحلة التالية، يتم إجراء تفاعلات كيميائية مع البكتيريا التي تم تحديدها من أجل تحديد نوعها بدقة.

ثقافة التبول

أثناء الدراسة يقوم مساعد المختبر بالتعرف على الكائنات الحية الدقيقة وتحديد عددها. القيمة التشخيصية هي 104-105 CFU/ml. إذا تجاوز تركيزهم القاعدة، فإنهم يتحدثون عن نتيجة إيجابية، أي أن خزان البذر سيء. يقتصر العلاج في هذه الحالة على تناول المضادات الحيوية الأكثر حساسية للكائنات الحية الدقيقة الملقحة. أثناء التحليل، هناك حالات يكون فيها التحليل العام جيدًا، ولا يوجد لدى الشخص أي شكاوى، ويظهر في خزان الثقافة بكتيريا الإشريكية القولونية. في هذه الحالة، على الأرجح، لم يتم استيفاء الشروط المعقمة. ولذلك، فإن جمع وإجراء الدراسات المتكررة يجب أن تتكرر.

ثقافة البلغم

يوصف تحليل مماثل لالتهاب الشعب الهوائية المتكرر والمطول. جنبا إلى جنب مع تحديد الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض، يحدد مساعد المختبر الحساسية للمضادات الحيوية. هذا يسمح لك بالتعيين بشكل صحيح علاج فعال، تقليل مدة المرض وتحقيق الشفاء اللازم.

ثقافة البراز

يتم فحص البراز في مختلف الالتهابات المعوية. في المادة، يحدد مساعد المختبر العامل الممرض. في الأمعاء السليمة، هناك بعض الكائنات الحية الدقيقة الانتهازية بالجودة والكمية المناسبة. إذا تغيرت البكتيريا المعوية، فإن هذه المؤشرات تتغير أيضا. يشكو المريض من الهادر ومشاكل في البراز وانتفاخ البطن وآلام في البطن. إذا حدث القيء وحدث اضطراب قوي في البراز، فسيتم وضع الخزان على دسباقتريوز.

تحتوي الثقافة البكتيرية للبراز على فك التشفير التالي:

• الدرجة الأولى: هناك تغيرات طفيفة في التكاثر الميكروبي، ولا توجد نباتات دقيقة غريبة.
• الدرجة الثانية: تم تغيير كمية البيفيدوفلورا واللاكتوفورا، كما يتم فحص عدد الإشريكية.
• الدرجة الثالثة: في هذه المرحلة، يتم تقليل اللاكتوفلورا، البيفيدوفلورا بشكل حاد أو غائبة تماما، ولكن الفطريات الشبيهة بالخميرة والمكورات العنقودية الانحلالية هي السائدة.
• الدرجة الرابعة: هنا يتغير التكاثر الميكروبي بشكل كبير، ويزداد عدد الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض بشكل كبير، ويتم اكتشاف البروتيوس.

تتأثر النتيجة بشدة (في الاتجاه الخاطئ) بتناول البريبايوتكس ومضادات الميكروبات.

زرع الحيوانات المنوية

يتم فحص القذف بحثًا عن أمراض المنطقة البولية التناسلية، وكذلك للاشتباه في العقم عند الذكور. يكشف زرع الخزان عن الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض، والتي يتم توجيه العلاج الرئيسي إليها في المستقبل.

هناك عدة قواعد لإيداع خزان البذر:

1. استبعاد كامل من الجماع لمدة 7 أيام.
2. حظر قاطع على تناول المنتجات الكحولية قبل 4 أيام من التحليل.
3. إذا تناول الرجل المضادات الحيوية، فسيتم وصف البذر بعد أسبوعين من انتهاء تناوله.
4. من الضروري جمع الحيوانات المنوية في وعاء به وسط غذائي خاص.
5. قبل الإجراء، تحتاج إلى التبول، من الجيد أن تغسل يديك بعامل مضاد للبكتيريا، وتصنع مرحاضًا بصابون مجرى البول. بعد ذلك، امسح القضيب والرأس بقطعة قماش معقمة. جمع الحيوانات المنوية باستخدام معالجات خاصة تسمى الاستمناء. لا يمكنك لمس الحاوية في هذه اللحظة. تحتاج إلى جمع السائل المنوي في الصباح.
6. راقب بدقة وقت تسليم الحيوانات المنوية: خلال ثلاث ساعات بعد إجراء الجمع. إذا لم يكن من الممكن لأي سبب من الأسباب تسليم المواد إلى المستشفى في الوقت المحدد، فيمكن وضعها في الثلاجة لفترة من الوقت. يجب ألا يتجاوز الوقت الذي يقضيه القذف هناك 24 ساعة.
7. إذا تم اختبار الحيوانات المنوية بحثًا عن الميكوبلازما والميورة، يتم وضع القارورة التي تحتوي على المادة في وسيلة نقل خاصة.
8. عادةً ما يكون تحليل السائل المنوي جاهزًا بعد أسبوع من التبرع.

البذر للنباتات

هذا هو اسم مجموعة المواد من المهبل. يتم إجراؤه باستخدام أدوات تسلسلية في المستشفى. إن أخذ المواد من المهبل لن يسبب الانزعاج والانزعاج للمرأة. ومع ذلك، فإن بعض الألم سيؤدي إلى تجمع المواد من مجرى البول. ولكن من أجل صحتك، يجب أن يتحمل هذا الإجراء. بالإضافة إلى ذلك، يجب أن تكون مستعدًا لتكرار الشعور بعدم الراحة عند التبول الأول بعد الحدث. لكنهم سوف يتركونهم بسرعة كبيرة.

عندما يبلغ خزان الثقافة عن المرض، سيصف الطبيب العلاج المناسب. بعد تناول الأدوية، يتم دائمًا إجراء خزان زرع ثانٍ. وفقا لنتائجه، سيكون الطبيب قادرا على ضبط العلاج الموصوف.

الثقافة البكتيرية أثناء الحمل

في أغلب الأحيان، يتم استخدام خزان البذر في أمراض النساء. خاصة أثناء الحمل. طوال فترة حمل الجنين، تجري المرأة الاختبارات اللازمة عدة مرات. تتضمن هذه القائمة أيضًا خزان البذر. يظهر للنساء الحوامل دون فشل. ويمكن أيضًا إجراء التحليل في مرحلة التخطيط للطفل الذي لم يولد بعد.

أثناء الحمل، يتم فحص المادة البيولوجية للبلعوم والأنف والبول. يتيح لك التحليل تحديد الكائنات الحية الدقيقة الخطيرة التي تؤثر سلبًا على نمو الطفل.

لا تخافوا من الإجراء نفسه. يتم أخذ المواد المخصصة للدراسة من قبل طبيب أمراض النساء بعناية فائقة.

من المعروف أن الاضطرابات في تكوين الجنين يمكن أن تسبب داء المشعرات والمكورات العنقودية الذهبية والميكوبلازما والكلاميديا ​​​​والميورة. إن وجود مثل هذه الكائنات الحية الدقيقة يمكن أن يؤدي إلى وفاة الجنين. تثير الفطريات مثل المبيضات التهابًا في الأنسجة، والتي تتعرض لاحقًا لتمزقات شديدة أثناء الولادة.

يتيح لك Bakposev التعرف على الأمراض التي تحدث بشكل كامن. كما أنها تشكل خطورة على الجنين وصحة الأم نفسها. وفي حالة اكتشافها يتم إجراء العلاج اللازم. وفي النهاية يصف الطبيب إجراء فحص بكتريولوجي ثانٍ.

في مشاورات نسائيةالتحقق من الثقافة من الأنف والحنجرة. التحليل ضروري للتعرف على المكورات العنقودية الذهبية، وهي السبب الرئيسي للإنتان بعد الولادة والتهاب الضرع القيحي. إذا تم اكتشافه، يتم العلاج قبل الولادة.

تتيح لك دراسة بول النساء الحوامل في المختبر اكتشاف الأمراض في الوقت المناسب. خلال هذه الفترة، يتم انتهاك مرور البول عبر المسارات الطبيعية ويتم إنشاء جميع الظروف في الجسم لتطوير البكتيريا الضارة. يساعد إيقاف هذه العملية على منع التهاب الحويضة والكلية، الذي غالبًا ما يعذب النساء الحوامل. هناك مواعيد نهائية معينة لتسليم خزان ثقافة البول. وهذا هو وقت التسجيل والأسبوع السادس والثلاثين من الحمل. سيتعين عليك إجراء الاختبارات عدة مرات إذا كانت لدى المرأة مؤشرات على ذلك. على سبيل المثال، أمراض الكلى وخلايا الدم البيضاء والبروتين في البول.

تقنية الثقافة البكتريولوجية

هناك العديد من التقنيات في المجموع. يتم تنفيذ معظمها باستخدام الأدوات التالية:

• الحلقة الميكروبيولوجية.
• طبق بيتري.
• حلقة خاصة مع الماصات.
• ملاعق.
• الإبر.

تعتبر الحلقة البكتيرية الميكروبيولوجية عالمية، حيث يتم استخدامها في جميع التقنيات. بالنسبة للمواد السائلة، يتم استخدام حلقة ماصة.

يتم استخدام الأداتين الأخيرتين عند البذر على طبق بيتري. فهي تعتبر مميزة. يتم استخدامه خصيصًا للزراعة على وسط كثيف. الكأس عبارة عن وعاء مختبري خاص مسطح الشكل وذو ارتفاع صغير. وهي مصنوعة من البوليسترين الشفاف أو الزجاج. يمكن أن يصل قطر طبق بيتري إلى 50-100 مل. يبلغ ارتفاعه دائمًا حوالي 15 مل. يمكن أن يكون طبق بيتري من نوعين: الزجاج والبلاستيك. الأول مخصص للاستخدام القابل لإعادة الاستخدام، والثاني يمكن استخدامه مرة واحدة فقط. أما الكوب البلاستيكي فهو أكثر تعقيما، حيث يتم تسليمه إلى المختبر في عبوة خاصة مغلقة بإحكام. يتم دائمًا تعقيم الكوب الزجاجي بعناية قبل الفحص البكتريولوجي.

يتم فحص باكبوسيف في وسائط خاصة يمكن أن تكون صلبة أو سائلة. إذا تكاثرت المادة السائلة، يستخدم مساعدو المختبر أنابيب الاختبار.

تقنية البحث البكتريولوجي هي كما يلي: يتم فتح طبق بيتري قليلاً، ثم يتم وضع المادة البيولوجية على وسط كثيف. بعد ذلك، ابدأ بملاحظة نمو هذه المادة. تبدأ البكتيريا في الزيادة تدريجياً في العدد، وتتحول إلى ثقافة كثيفة كاملة. ثم يبدأون في الانقسام إلى مستعمرات. وبعد عدد معين من الأيام، يقوم مساعد المختبر بتحديد العامل الممرض. وبالتوازي مع ذلك، يتم إجراء اختبار الحساسية للمضادات الحيوية.

نتيجة البذر

في نهاية الدراسة، يجب أن يحصل مساعد المختبر على تقييمين من عينة الاختبار:

• النوعية (ما إذا كان هناك مسبب مرضي مشتبه به في المادة البيولوجية المدروسة).
• الكمية (ما تم العثور على التركيز).

ويتم فك تشفير التقييم النوعي باستخدام معدلات النمو. لا يوجد سوى أربعة منهم.

• الدرجة الأولى: نمو طفيف في وسط سائل نوعاً ما، ولا نمو في وسط صلب.
• الدرجة الثانية: يحدث النمو في وسط كثيف (حوالي 10 مستعمرات).
• الدرجة 3: يتم أيضًا تقييم النمو في الوسط الصلب (10-100 مستعمرة).
• الدرجة الرابعة: أكثر من 100 مستعمرة.

وفي حالة اعتبار النباتات الانتهازية، فإن الدرجتين الأوليين لا تعتبران من الأمراض. على الأرجح، هذا هو التلوث المعتاد للمواد البيولوجية. تسمح لك الدرجة الثالثة والرابعة بتحديد سبب المرض بالفعل.

إذا أظهر التحليل وجود نباتات مسببة للأمراض، فسيتم أخذ جميع الدرجات الأربع المدرجة في الاعتبار.

يتم قبول القياس الكمي بشكل مشروط ويتم تحديده في CFU. الخاصية تعني مجتمع من الخلايا البكتيرية التي يمكن أن تنمو لتصبح مستعمرة.

ترتبط المستعمرات وCFU/ml على النحو التالي:

• 103/ مل يعد مستعمرة واحدة؛
• 104/ مل يتم أخذ 1-5 مستعمرات؛
• 105/ مل نمو كافي لـ 5-15 مستعمرة؛
• 106/مل ويعتبر أن هناك أكثر من 15 مستعمرة.

القياس الكمي لا يقل أهمية. فهو يساعد على تحديد درجة التلوث والسيطرة على العلاج المنجز.

هناك شروط تقريبية لاستعداد نتائج البذر:

• النباتات: 4-7 أيام.
• - مخاط من البلعوم الأنفي: 5-7 أيام.
• البراز: 4-7 أيام.
• المادة البولية التناسلية: 4-7 أيام.
• الدم لتحديد العقم: 10 أيام. ومع ذلك، هنا يمكننا أن نقول النتيجة الأولية في ثلاثة أيام.

يعد البذر البكتيري إجراءً مهمًا للغاية يوفر معلومات جيدة عن العامل المسبب لمرض يصيب الإنسان. إذا وصفه الطبيب فيجب اجتياز التحليل.

يتم أخذ مادة الفحص البكتريولوجي إلى طبق معقم من قبل

بدء العلاج بالمضادات الحيوية.

التسليم مع الالتزام بالمواعيد النهائية في بيكس دون انخفاض حرارة الجسم.

دم

بالنسبة للعقم (النباتات الدقيقة، ثقافة الدم)، يتم تناوله بطريقة معقمة أثناء رفع درجة الحرارة إلى وسط مغذٍ "مزدوج" يتم تسخينه إلى 37 درجة مئوية بكمية 10 مل عند البالغين و0.1-5 مل عند الأطفال (بنسبة 1:10). ). يتم أخذ عينات الدم من قبل شخصين: أحدهما يعالج الجلد، وثقب الوريد ويأخذ الدم إلى حقنة، والثاني يفتح أغطية القوارير فوق لهب مصباح الكحول، ويضعه تحت تيار من الدم من حقنة ، يحرق عنق القوارير أو أنابيب الاختبار، ويغلقها ويتجانسها حتى لا تكون هناك جلطات دموية. وفقا للمؤشرات، يتم إجراء اللطاخة في وقت واحد على شريحة زجاجية. تسليم دون انخفاض حرارة الجسم. يوصى بأخذ الدم في نفس الوقت في ثلاث قوارير. في المساء، ليلاً ويوم الأحد، ضع زجاجات الدم في منظم حرارة عند 37 درجة مئوية في المختبر السريري.

البول

يتم أخذ جزء الصباح (التراكمي) المتوسط ​​من البول بعد مرحاض الأعضاء التناسلية الخارجية إلى البكتيريا بكمية 3-5 مل. يتم التسليم في موعد لا يتجاوز ساعتين إذا تم تخزينه في الثلاجة. في التهاب الإحليل، التهاب المثانة - أخذ عينات من الجزء الأول من البول.

اللعاب

قبل أخذ العينات، اغسل أسنانك بالفرشاة، واشطف فمك بالماء المغلي الطازج أو بمحلول مطهر، واجمع البلغم الصباحي (التراكمي) بدون لعاب بكمية 1-5 مل. يتم التسليم في موعد لا يتجاوز ساعتين من لحظة الاستلام.

1. في حالة الأمراض - باستخدام قطعة قطن معقمة بشكل منفصل لكل أنف
بالطبع من الأقسام العميقة بعد تحرير الأنف من المخاط. عندما تجف
الغشاء المخاطي - مبلل بمحلول كلوريد الصوديوم 0.9٪ باستخدام قطعة قطن.

2. لنقل المكورات العنقودية الذهبية - من الأجزاء الأمامية للتجويف الأنفي
بمسحة واحدة من الممرات الأنفية دون ملامسة جلد الأنف. يسلم إلى

على معدة فارغة أو بعد ساعتين من تناول الوجبة، سائل.

1. للدفتيريا - استخدام ملعقة مع مسحة على الحدود السليمة والمتضررة

الأقمشة. في نفس الوقت مسحة مسحة من كلا الممرات الأنفية.

إذا كنت تشك في الإصابة بالدفتيريا - 2 أو 3 مسحات من الحلق للتنظير الجرثومي المباشر واختبار السمية والبذر. حسب المؤشرات - مسحة من أماكن التوطين النادرة والبلعوم والأنف. تسليم في غضون ساعتين دون انخفاض حرارة الجسم. في المساء، ساعات الليل، الأحد، قم بخفض المادة إلى بيئة تخصيب دافئة وتخزينها في منظم حرارة +37 درجة مئوية.

2. على النباتات الدقيقة - استخدم ملعقة بقطعة قطن لمسح الجهة اليمنى
اللوزتين، الأقواس، اللهاة، اللوزة اليسرى، الجدار الخلفي للبلعوم. لا تلمس
الغشاء المخاطي للفم واللسان! تسليم في غضون ساعتين دون انخفاض حرارة الجسم.

3. بالنسبة للمكورات السحائية - يتم أخذ العينات والبذر بجانب سرير المريض أو المختبر
مساعد مختبر، عالم بكتيريا من الجدار الخلفي للبلعوم الأنفي بملعقة
يتم ثني المسحة بزاوية 45% في الجزء السفلي من طولها مقابل أنبوب الاختبار. التسليم و
البذر على الفور!

4. في حالة السعال الديكي - بجانب سرير المريض أو في المختبر، يقوم مساعد المختبر بالإخراج من الخلف
جدار البلعوم (الدامبون للأسفل) بمسحة قطنية منحنية بزاوية 45 درجة. توصيل
وتزرع على الفور دون انخفاض حرارة الجسم.

5. للفطار - بقطعة قطن من المناطق المصابة من الغشاء المخاطي. يسلم إلى
لمدة ساعتين دون انخفاض حرارة الجسم.

غسل الماء من الشعب الهوائية

في أنبوب اختبار معقم بكمية 5 مل. تسليم في غضون ساعتين دون انخفاض حرارة الجسم.

ليكفور

يتم وضع الأجزاء الأخيرة بكمية 1-3 مل في أنبوب اختبار معقم وفقًا لقواعد التعقيم فوق مصباح الكحول. قم بالتسليم فورًا في علبة دافئة أو ضعه في درجة حرارة 37 في منظم الحرارة.

رأس قابل للتفريغ

قم بمعالجة الجلد حول الجرح مسبقًا بمحلول مطهر، وقم بإزالة الكتل النخرية والمخلفات والقيح بمنديل معقم. تؤخذ المادة بقطعة قطن بحركات دورانية دائرية من المركز إلى الأطراف. حسب المؤشرات - 2 مسحة، واحدة للتنظير البكتري الأصلي.

بواسطة سيتو! - 3 مسحات للتنظير الجرثومي والزرع والحساسية للمضادات الحيوية. إذا كان هناك تصريف في الجرح، قسطرة - الجزء الداخليتقطع بمقص معقم وتوضع في قارورة تحتوي على وسط غذائي. تسليم في غضون 1-2 ساعات دون انخفاض حرارة الجسم. خارج ساعات المختبر، يتم نقل المادة إلى وسط التخصيب وحفظها في حاضنة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية في المختبر السريري.

نقاط. المواد على اللاهوائية. جروح عميقة قابلة للتفريغ. قطع من الأقمشة

المواد الأصلية في حقنة بمبلغ 0.5-3 مل، في نهاية الإبرة - أنبوب اختبار مطاطي، ملفوف في منديل معقم، في غضون 0.5-2 ساعات، توضع قطع من الأنسجة المصنوعة من مادة أصلية بكمية 0.5-3 مل في قوارير معقمة وأنابيب اختبار. التوصيل خلال ساعتين أو باستخدام مادة الثيوجليكول المتوسطة - التوصيل خلال 12-24 ساعة.

عيون

5-6 ساعات قبل الجمع، قم بإلغاء جميع الإجراءات والأدوية. الملتحمة - بقطعة قطن مخاطية من الخارج إلى الحافة الداخلية دون ملامسة الجلد بشكل منفصل عن كل عين.

سر الكيس الدمعي - بعد التدليك يتم فصله بقطعة من القطن.

حواف الجفون - قم بإزالة القشور وأخذ مسحة من القروح عند قاعدة الرموش أو اسحب بعض الرموش واغمرها في وسط مغذٍ. تسليم في غضون ساعتين دون انخفاض حرارة الجسم.

الأعضاء التناسلية

قناة "C" - بقطعة قطن في المرايا قبل الفحص اليدوي، بعد معالجة الجزء المهبلي مسبقًا بقطعة قطن مبللة بمحلول ملحي، دون لمس جدران المهبل.

الفرج - قبل الفحص اليدوي، بعد إدخال المرآة والمصعد، خذ قطعة قطن من المناطق المتغيرة بشكل مرضي.

الرحم وزوائد الرحم - أثناء الجراحة، خذ الإفرازات وقطع الأعضاء في قارورة أو أنبوب اختبار مع وسط غذائي.

مجرى البول القابل للفصل - بعد مرحاض الأعضاء التناسلية الخارجية، خذ قطعة قطن، دون لمس الجلد. تسليم في الشيشان 1-2 ساعات دون انخفاض حرارة الجسم.

وفقًا للإشارة، بالتوازي مع أخذ المادة، يقوم طبيب أمراض النساء (طبيب المسالك البولية) بإعداد مسحات على شريحة زجاجية باستخدام مسحات قطنية معقمة منفصلة أو أدوات أمراض النساء، وتوزيع المادة بالتساوي دون فرك خشن وحركات ضربة حادة.

على داء الميورات

بدون مضادات حيوية لمدة أسبوعين قبل الاستفزاز.

للرجال:

من مجرى البول، لا تتبول لمدة 4-6 ساعات، قم بمعالجة حشفة القضيب بقطعة قطن معقمة مبللة بمحلول NuCl 0.8٪ في منطقة الفتحة الخارجية. قم بإزالة القطرات الأولى من الإفرازات، وزرع القطرات اللاحقة. إذا لم يكن هناك إفرازات، فقم بكشط ملعقة فولكمان على عمق 2-3 سم؛ 10 مل من البول الأول، زرع الرواسب.

بين النساء:

من مجرى البول بعد التدليك عبر المهبل بملعقة فولكمان في وسط غذائي.

من القناة "C"، القبو الخلفي للمهبل بعد المعالجة المسبقة باستخدام قطعة قطن معقمة مبللة بمحلول كلوريد الصوديوم المعقم بنسبة 0.8%، والكشط بملعقة فولكمان.

يجب تسليم الوسط المغذي بعد البذر إلى المختبر خلال ساعة واحدة أو وضعه عند 37 درجة مئوية في منظم الحرارة.

الصفراء

عند الفحص عند أخذ الصفراء إلى المختبر السريري، قم بفصل الأجزاء A، B، C إلى ثلاثة أنابيب اختبار معقمة بكمية 2-5 مل، أو أثناء الجراحة باستخدام حقنة في أنبوب اختبار، مع مراعاة قواعد العقامة. تسليم في غضون 2 ساعة.

حليب الثدي

مع مراعاة قواعد العقامة. بعد مرحاض الغدد الثديية، بعد صب القطرات الأولى في منديل. قم بتوصيل كمية 1-3 مل في قوارير معقمة خلال 0.5-1 ساعة.

في حالة تلف الأذن الخارجية، يعالج الجلد بـ 70 كحول، ثم يغسل بالمحلول الملحي. ثم يتم جمع الإفرازات من التركيز باستخدام قطعة قطن. تسليم في غضون ساعتين دون انخفاض حرارة الجسم.

في حالة وجود ضرر في الأذن الوسطى، يتم فحص النقط والمواد التي تم الحصول عليها أثناء التدخلات الجراحية، والتي تم جمعها في طبق معقم أو باستخدام وسط غذائي (خارج ساعات المختبر).

1. للدوسنتاريا - الأجزاء الأولى، للسالمونيلا - الأجزاء الأخيرة، أو
من السفينة دون أن يترك أثرا للديس. محاليل بكمية 0.5-1 جم في أنبوب اختبار
مادة حافظة الجلسرين (يخزن في الثلاجة من لحظة تناوله حتى 12
ساعات)، أو الأصلي في حاوية معقمة. تسليم في غضون 2 ساعة.

2. للكوليرا - 0.5-1.5 جرام من مادة حافظة محلية أو خاصة بالكوليرا.

3. لعلاج دسباقتريوز والفطريات والمكورات العنقودية الذهبية المسببة للأمراض. UPM (الانتهازية
البكتيريا) 1-2 جرام من البراز الأصلي في قوارير معقمة وفقًا لـ
قواعد العقامة. تسليم في غضون ساعتين دون انخفاض حرارة الجسم.

الطريقة البكتريولوجية - عزل الثقافات النقية للميكروبات وتحديدها لاحقا - لها أهمية كبيرة في تشخيص الأمراض المعدية، في دراسة الحالة الصحية والصحية للأشياء البيئية (الماء والهواء والتربة والغذاء). ومع ذلك، فإن الخطوة الأولى في هذه التقنية هي التلقيح أو إعادة التلقيح للمزرعة البكتيرية على أنواع مختلفة من الوسط الغذائي. يمكن أن تكون مادة البذر عبارة عن ثقافات بكتيرية، وإفرازات مختلفة من الحيوانات والبشر، وأنسجة الجثة، والماء، والتربة، والغذاء. يتم أخذ المادة السائلة للبذر بحلقة أو ماصة. عند أخذ السائل بواسطة حلقة، يجب أن يشكل طبقة رقيقة شفافة في حلقة الحلقة - "مرآة". يتم استخدام الماصات عندما يتم تلقيح المادة بكميات كبيرة أو يتم قياسها بدقة. يتم تحديد طريقة أخذ المواد الكثيفة من خلال اتساقها. عند البذر، غالبا ما تستخدم الحلقة البكتيرية. يتم تنفيذ جميع عمليات التلاعب المرتبطة ببذر وعزل الثقافات الميكروبية على لهب الموقد. يتم إشعال الحلقة البكتيرية فوق اللهب مباشرة قبل تناول المادة، ثم يتم تبريد الحلقة. للقيام بذلك، عند إعادة زرع مزرعة ميكروبية من أنبوب اختبار، يتم غمر الحلقة الساخنة في سائل تكثيف، وعند إعادة البذر من أطباق بيتري، فإنها تلامس سطح الوسط المغذي الخالي من نمو الميكروبات. لا تتسبب الحلقة المبردة بشكل كافٍ في فوران سائل التكثيف ولا تذوب الأجار عند ملامسته للوسيط. بعد الانتهاء من البذر، يتم حرق الحلقة مرة أخرى لتدمير الثقافة الميكروبية الموجودة عليها أو المادة المصابة بالكائنات الحية الدقيقة. الماصات والملاعق المستخدمة في البذر وتغمس في محلول مطهر. بعد البذر على أطباق بتري من الأسفل، وعلى أنابيب الاختبار في الثلث العلوي، يُكتب اسم المادة البذرية، ويوضع رقم التحليل وتاريخ البذر.

تقنية زراعة المحاصيل على الوسائط المغذية الصلبة والسائلة: 1. عند البذر في وسط مغذي سائل، يتم غمر الحلقة مع المادة الموجودة عليها في الوسط. إذا كانت المادة لزجة ولم تتم إزالتها من الحلقة، فإنها

الشكل 11. مخطط نقل الميكروبات من أنبوب اختبار إلى أنبوب اختبار.

يفرك على جدار الوعاء، ثم يغسل بوسيط سائل. يتم سكب المواد السائلة المجمعة في ماصة باستور أو ماصة مدرجة في وسط غذائي. 2. عند الزراعة على أجار الببتون اللحمي المشطوف يؤخذ الأنبوب باليد اليسرى بين الأصابع 1 و 2 بحيث تكون قاعدة الأنبوب على سطح اليد ويتم التلقيح تحت مراقبة عين. تتم إزالة الفلين من أنبوب الاختبار بأصابع اليد اليمنى V و IV، دون لمس جزء الفلين الذي يدخل داخل أنبوب الاختبار. تبقى الأصابع الثلاثة المتبقية من اليد اليمنى حرة في التقاط الحلقة البكتيرية، التي يتم من خلالها إجراء البذر. يتم تثبيت الحلقة مثل قلم الكتابة. بعد إزالة السدادة، يتم الاحتفاظ بأنبوب الاختبار الذي يحتوي على الوسط المغذي في وضع مائل لمنع دخول الكائنات الحية الدقيقة الأجنبية إليه من الهواء. يتم إدخال الحلقة التي تحتوي على المادة الملقحة في أنبوب الاختبار إلى الأسفل، ويتم إنزالها بشكل مسطح على سطح الوسط المغذي ويتم تطبيق ضربة بحركات انزلاقية من الأسفل إلى الأعلى، من أحد جدران أنبوب الاختبار إلى جدار آخر ( تين.).

3. عند البذر على سطح وسط مغذٍ كثيف في أطباق بيتري، يُمسك الكوب باليد اليسرى. من ناحية، يتم تثبيت الجزء السفلي منه بالإصبعين 1 و2، ومن ناحية أخرى بالإصبعين IV وV. الغطاء مفتوح بحيث يمكن للحلقة أو الملعقة أن تمر بحرية في الفجوة المتكونة، ويتم تثبيته بأصابع 1 وIII أو 1 و2 (الشكل). لا عدد كبير منمن مادة الاختبار بحلقة بكتيرية على سطح الوسط المغذي عند حافة الطبق. يتم بعد ذلك حرق الحلقة لتدمير المواد الزائدة الموجودة عليها. يبدأ خط البذر من المكان الذي توجد فيه المادة. يتم وضع الحلقة البكتيرية بشكل مسطح على الوسط المغذي حتى لا يتم خدش سطحه، ويتم عمل خطوط على الوسط بأكمله أو في قطاعات، بعد قطع قاع الطبق أولاً (شريطة أن يكون الوسط شفافًا) إلى عدة أجزاء متساوية . من الضروري أن نحاول أن تكون الضربات التي تطبقها الحلقة قريبة قدر الإمكان من بعضها البعض، حيث يؤدي ذلك إلى إطالة خط البذر المشترك ويجعل من الممكن توزيع المادة الملقحة بالتساوي على سطح وسط مغذٍ كثيف، بدلاً من يمكن استخدام حلقة أو مسحة أو ملعقة.

أرز. 12. البذر على وسط مغذٍ صلب في أطباق بيتري.

مع وجود وفرة من الميكروبات في المادة المزروعة، فإنها تنمو على شكل فيلم يغطي كامل سطح الوسط المغذي. تسمى هذه الخاصية للنمو الميكروبي بالمستمر، أو العشب. يتم زرع العشب عندما يكون من الضروري الحصول على كميات كبيرة من الثقافة الميكروبية لنوع واحد. 4. يتم تحضير المعلق من المادة المراد تلقيحها في وسط مغذي كثيف في ماء الصنبور المعقم أو في محلول متساوي التوتر. اجمع 0.1-1 مل من المعلق في ماصة (اعتمادًا على درجة التلوث الميكروبي المتوقع) واسكبه في طبق بيتري معقم فارغ. بعد ذلك، يُملأ الكوب بـ 15-20 مل من أجار ببتون اللحم، ويُذاب ويُبرد إلى درجة حرارة 40-45 درجة مئوية (عند درجة الحرارة هذه، يجب ألا يسبب أنبوب الاختبار مع الوسيط المطبق على الخد حرقًا إحساس). لتوزيع مادة الاختبار بشكل موحد في الوسط المغذي، يتم تدوير الكوب المغلق الذي يحتوي على المحتويات قليلاً على سطح الطاولة. 5. يتم البذر عن طريق الحقن في عمود من الوسط المغذي في أنبوب اختبار مع وسط متجمد على شكل عمود. يؤخذ الأنبوب باليد اليسرى كالعادة، وفي وسط العمود إلى أسفل الأنبوب يتم حقن حلقة بالمواد الموجودة عليه.

الحصول على الثقافات النقية. الثقافة النقية للميكروبات هي مجموعة من الكائنات الحية الدقيقة من نفس النوع يتم الحصول عليها من مستعمرة ميكروبية معزولة. ويقصد بالمستعمرة الميكروبية ذرية البكتيريا الناتجة عن تكاثر خلية ميكروبية واحدة. يعد عزل ثقافة الميكروبات النقية خطوة إلزامية في أي دراسة بكتريولوجية. تعتبر الثقافة النقية ضرورية لدراسة الخصائص المورفولوجية والثقافية والثقافية والكيميائية الحيوية والمستضدية، والتي يحدد مجملها نوع الكائنات الحية الدقيقة قيد الدراسة.

تم اقتراح العديد من الطرق المختلفة لعزل مزارع الميكروبات النقية من المواد التي تحتوي على نباتات دقيقة مختلطة وفيرة. الطريقة الأكثر استخدامًا هي الفصل الميكانيكي للكائنات الحية الدقيقة الموجودة في مادة الاختبار من أجل الحصول على مستعمرات معزولة على السطح أو في عمق الوسط المغذي. تُستخدم الوسائط المغذية الاختيارية على نطاق واسع جدًا، مما يحفز تطور تلك الكائنات الحية الدقيقة، التي من المفترض أن يتم عزل ثقافتها النقية. بعض أنواع الميكروبات حساسة للغاية لعوامل بيئية معينة. تم استخدام المقاومة الفردية للميكروبات لعامل أو آخر لتطوير طرق لعزل الثقافات النقية عن طريق قتل النباتات الدقيقة المصاحبة لها. تُستخدم هذه الطريقة لعزل الأشكال البوغية من الميكروبات المقاومة لها درجة حرارة عالية، المتفطرة السلية، غير مبال لعمل المحاليل المركزة للأحماض المعدنية، على عكس الميكروبات الأخرى الموجودة في البلغم. عند عزل مزرعة نقية من الميكروبات المسببة للأمراض من المواد المرضية الملوثة بالنباتات الدقيقة الدخيلة، فإنها تلجأ في بعض الأحيان إلى إصابة حيوانات المختبر المعرضة لنوع الميكروب الذي يفترض عزله من المادة قيد الدراسة. يتم استخدام الطريقة البيولوجية لعزل الثقافة النقية في دراسة البلغم لمحتوى المكورات الرئوية والمتفطرة السلية فيه. هناك طرق قليلة نسبيًا معروفة لعزل البكتيريا كمستنبتات نقية. ويتم ذلك غالبًا عن طريق عزل الخلايا الفردية على وسط غذائي صلب باستخدام طريقة البذر المتسلسل.

من مزرعة نقية، تنمو نفس المستعمرات عادةً، ويتم اكتشاف الخلايا المماثلة بواسطة الفحص المجهري، خاصة في الحجم وصبغة جرام. ومع ذلك، هناك استثناءات ممكنة، على سبيل المثال، قد تكون المستعمرات التي تنمو من مزرعة نقية ناعمة (S) وخشنة (R). بالإضافة إلى ذلك، قد تظهر الخلايا الكُورانية والخراجات والجراثيم في المزارع النقية لمختلف الكائنات الحية الدقيقة. وأخيرا، تظهر بعض الكائنات الحية الدقيقة تقلب الجرام. بذر السكتة الدماغية. هناك العديد من الطرق لتخطيط صفائح الوسائط الصلبة ("الصفائح المخططة")، لكن القليل منها فقط تقريبًا دائمًا ما يعطي مستعمرات معزولة جيدًا، حتى في غياب مهارة المجرب. ومن الممكن أيضًا صب محاليل الثقافة المختلطة المخففة على سطح الوسائط الصلبة في الأطباق. عند العمل مع اللاهوائيات، يتم بعد ذلك تحضين "الأطباق المخططة" أو الأطباق التي تحتوي على مستنبت سائل يتم إدخالها في جو هوائي في بالون لا هوائي. تتطلب اللاهوائيات وسائط محضرة حديثًا ويجب أن تكون مخططة خلال أول 4 ساعات بعد التعقيم لتجنب تراكم الأكسجين المذاب.

الشكل 13. طريقة ملائمة للوحة الخطية للمستعمرات المفردة. أ. لوضع علامة على الجانب الخلفي من طبق بيتري، يتم وضع حرف T بقلم رصاص، وتقسيم الجزء السفلي إلى 3 قطاعات. ب. يتم رسم حلقة ثقافة متعرجة على سطح الآجار في القطاع 1 كما هو موضح في الشكل. للقيام بذلك، يتم رفع غطاء الكأس أولا، وبعد تطبيق السكتة الدماغية، يتم إغلاقه على الفور. يتم تعقيم الحلقة باللهب وتترك لتبرد (15 ثانية). ج. ارسم حلقة فوق سطح الوسط في القطاع 1، كما هو موضح في الشكل، ثم قم على الفور بتطبيق ضربات بها بنمط متعرج على سطح الوسط في القطاع 2. قم بتسخين الحلقة في اللهب واتركها ليبرد. د. ارسم حلقة فوق سطح الوسط في القطاع 2، كما هو موضح، ثم قم بتطبيقها بضربة متعرجة على سطح الوسط في القطاع 3. سطح أجار. ينمو عدد كبير من المستعمرات في القطاع 1، بينما تظهر المستعمرات الفردية المعزولة جيدًا في القطاعين 2 و3.

الحصول على ثقافة نقية عن طريق النخل في عمق الوسط (حسب كوخ). تم وضع ثلاثة أنابيب اختبار تحتوي على 15 مل من أجار الببتون اللحمي في حمام مائي لإذابة الأجار. يتم تبريد الوسط المنصهر إلى درجة حرارة 43-45 درجة مئوية. يتم إدخال حلقة بكتيرية واحدة من مادة الاختبار في أنبوب الاختبار. لخلط المادة بشكل أفضل مع الوسط، يتم تدوير الأنبوب الملقّح عدة مرات، مع الاحتفاظ به بين راحة اليد. بعد ذلك، يتم نقل محتويات أنبوب الاختبار الأول بحلقة مكلسة ومبردة إلى الأنبوب الثاني وبنفس الطريقة من الثاني إلى الثالث. تُسكب التخفيفات المحضرة من الميكروبات من أنابيب الاختبار إلى أطباق بتري معقمة، مميزة بأرقام تتوافق مع أرقام أنابيب الاختبار. بعد أن يتصلب الوسط الذي يحتوي على مادة الاختبار، يتم وضع الأكواب في منظم الحرارة. يتناقص عدد المستعمرات في لوحات الثقافة مع تخفيف المادة.

عزل الثقافة النقية بطريقة Drygalsky. يُسكب الوسط المغذي المنصهر في ثلاثة أطباق بتري. يجب تجفيف الوسط المجمد، لأن سطحه الرطب يساهم في تكوين نمو متموج. تضاف قطرة واحدة من مادة الاختبار إلى الكوب الأول وتفرك على سطح الوسط المغذي باستخدام ملعقة معقمة. علاوة على ذلك، دون حرق الملعقة ودون الحصول على مادة جديدة، يتم نقل الملعقة إلى الأكواب الثانية والثالثة، وفرك المادة المتبقية عليها على سطح الوسائط المغذية. إن طريقة الغربلة السطحية التي اقترحها Drygalsky هي الطريقة الأكثر استخدامًا للحصول على مزرعة نقية من الميكروبات. بدلا من ملعقة، يمكنك استخدام حلقة. يتم توزيع المادة الموجودة في الوسط المغذي بضربات متوازية على الطبق بأكمله في اتجاه واحد. بعد ذلك، قم بتدوير الكوب بمقدار 180 درجة، وارسم ضربات في الاتجاه المتعامد مع الضربات الأولى. باستخدام طريقة البذر هذه، يتم استهلاك المادة الموجودة في الحلقة تدريجيًا، وتنمو مستعمرات معزولة من الميكروبات على طول خطوط الشبكة المطبقة في نهاية البذر.

دراسة الخصائص الثقافية للكائنات الحية الدقيقة

يتم تحديد الخصائص الثقافية للميكروبات من خلال طبيعة نموها على الوسائط المغذية. كونها ثابتة لكل نوع من الميكروبات، فهي ميزة تشخيصية مهمة.

نمو الميكروبات على وسط غذائي صلب.لدراسة خصائص المستعمرات، يتم زراعة الميكروبات على وسائط مغذية كثيفة في أطباق بيتري. عند زرع المادة، يحاولون الحصول على نمو معزول للمستعمرات. يتم رؤية لوحات البذر أولاً بالعين المجردة أو من خلال عدسة مكبرة، ثم يتم وضعها رأسًا على عقب على مسرح المجهر ويتم رؤية المستعمرات في الضوء المنقول باستخدام عدسة تكبير منخفضة وفتحة ضيقة. تتميز المستعمرات بالحجم والشكل وكفاف الحافة والتضاريس والسطح واللون والبنية والاتساق. حجم المستعمرة يتحدد حسب قطرها. اعتمادًا على القطر، يتم تمييز المستعمرات على أنها منقط (قطر أقل من 1 مم)، صغيرة (قطر 1-2 مم)، متوسطة (قطر 2-4 مم) وكبيرة (قطر 4-6 مم أو أكثر). شكل مستعمرة صحيح في بعض الأحيان - مستدير، غير منتظم - أميبي، جذري - على شكل جذر، يشبه جذور الأشجار المتشابكة. حرف كفاف الحافة يتم تحديده عن طريق فحص المستعمرة تحت عدسة مكبرة أو مجهر منخفض التكبير. التمييز بين الحواف الناعمة على شكل خط محدد بوضوح وغير المستوي. وتنقسم الأخيرة إلى:

حافة صدفية تتكون من أسنان كبيرة مستديرة قليلاً أو مسطحة بالشكل الصحيح ؛

حافة متموجة تختلف إلى حد ما عن الحافة الصدفية حيث لا يتم التعبير بوضوح عن أسنانها الكبيرة؛

حافة متآكلة أو خشنة تتكون من أسنان حادة ذات أحجام وأشكال مختلفة ؛

حافة مهدب مع الزغابات الحساسة.

في بعض الحالات، لا يوجد خط محدد بوضوح يحدد المستعمرة من سطح الوسط. هذه الحافة من المستعمرة تسمى غامضة. إغاثة المستعمرة تتميز بارتفاعها فوق سطح الوسط المغذي ومحيط الشكل في مقطع عمودي. يتم تحديد تضاريس المستعمرة بالعين المجردة أو باستخدام عدسة مكبرة عند النظر إليها من الأعلى ومن الجانب.

الشكل 14. شكل المستعمرات:

حول؛ ب - مستديرة ذات حافة صدفية؛ الخامس- جولة مع الأسطوانة على طول الحواف؛ د، د -جذري. ه - مستدير بحافة جذرية ؛ ز - الأميبا. ح - خيطي. و - مطوية؛ ك - خطأ؛ ل- متحدة المركز؛ م - معقدة

يميز: 1) المستعمرات الصحيحة على شكل قطرة وقبة شكل دائريمع درجة مختلفة من التحدب، والتي تمثل في المقطع الرأسي قطعة من الكرة وتختلف فقط في طول نصف القطر. المستعمرات محدبة قليلاً ولها نصف قطر كبير؛ مقبب - أصغر؛

2) المستعمرات محدبة بلانو ذات قمة مسطحة أو حواف منحدرة بلطف أو مكسورة بشكل حاد ؛ لها شكل شبه منحرف في مقطع عمودي.

3) مستعمرات مخروطية الشكل لها شكل مثلث في مقطع رأسي:

4) مستعمرات ذات وسط مرتفع على شكل حلمة وأسطوانة على طول المحيط؛

5) مستعمرات ذات مركز منخفض.

6) المستعمرات مسطحة، تزحف على طول سطح الوسط. يتم فحص سطح المستعمرة باستخدام عدسة مكبرة أو تحت المجهر بتكبير منخفض. سطح المستعمرات يكون غير لامع أو لامع مع لمعان، جاف أو رطب، ناعم أو خشن. يتم تحديد المستعمرات الملساء بالحرف S (ناعم)، والخشنة - بالحرف R (الخشن)، مما يعني "ناعم" و"خشن" على التوالي. ترجع آلية تكوين الأشكال الملساء والخشنة للمستعمرات إلى الاختلاف في عمليات انقسام الخلايا. توجد الخلايا الميكروبية في المستعمرات ذات الشكل S، وتلامس أسطحها الجانبية، والخلايا ذات الشكل R، التي تحتفظ بالجسور السيتوبلازمية أثناء الانقسام، وتشكل سلاسل تتداخل مع بعضها البعض، وتسبب سطحًا خشنًا وحافة غير مستوية للمستعمرة.

لوحظ انتقال أشكال S إلى أشكال R أثناء التفكك. يتم ملاحظة ظاهرة التفكك في الميكروبات المسببة للأمراض تحت تأثير المضادات الحيوية والعلاج الكيميائي، وعوامل المناعة المحددة التي تتشكل أثناء العملية المعدية، وكذلك العوامل البيئية. من بين الأشكال الخشنة للمستعمرات: مطوية، تلفيفية، تشبه في مظهرها سطح الدماغ المخطط بالتلافيفات؛ ثؤلولي، مخطط بشكل مركزي أو شعاعي؛ شغرين، أي ناعم الحبيبات.

لون مستعمرة يتم تحديده بواسطة الصباغ الناتج عن ثقافة الميكروبات. الغالبية العظمى من البكتيريا المسببة للأمراض لا تشكل صبغة، ونتيجة لذلك تكون مستعمراتها عديمة اللون أو لونها عكر حليبي، على غرار العقيق. في الضوء المنقول، تكون هذه المستعمرات أكثر أو أقل شفافية. تعطي أنواع الميكروبات المكونة للصباغ مستعمرات بألوان مختلفة: الكريمي والأصفر والبرتقالي الذهبي والأزرق والأحمر والأرجواني والأسود وما إلى ذلك.

هيكل المستعمرات يتم تحديده في الضوء المنقول بتكبير مجهري منخفض، أو بفتحة ضيقة، أو بمكثف منخفض قليلاً. في المستعمرات المصطبغة والمستعمرات التي لا تنقل الضوء، لم يتم تحديده.

حسب طبيعة الهيكل، تتميز الأنواع التالية من المستعمرات:

1) زجاجي - عديم اللون، شفاف، بدون بنية محددة مرئية؛

2) حبيبية، والتي، اعتمادا على حجم الحبوب، مقسمة إلى حبيبات ناعمة وخشنة؛

3) خيطية أو ليفية، تتميز بوجود خيوط طويلة متشابكة بكثافة في سمك المستعمرة.

المستعمرات إما متجانسة أو غير متجانسة. هيكل الأول هو نفسه في جميع الأجزاء، وفي الأخير يختلف الجزء المركزي عن الجزء المحيطي، أو أن القطاعات الفردية لها هيكل مختلف عن بقية الكتلة.

اتساق المستعمرة والتي تحدد حالتها الفيزيائية، ويتم فحصها عن طريق لمسها أو أخذ جزء من المادة منها بواسطة حلقة بكتيرية. حسب طبيعة اتساق المستعمرة هي:

1) فطيرة، قابلة للإزالة بسهولة ومتآكلة على سطح الوسط المغذي مثل الزبدة؛

2) لزجة أو مخاطية، تلتصق وتصل إلى الحلقة؛

3) ليفية أو جلدية، كثيفة، إزالتها من سطح الوسط الغذائي في شكل فيلم مرن يتوافق مع حجم وشكل المستعمرة؛

4) حلقات هشة وجافة تتفتت عند لمسها.

ملامح النمو الميكروبي على الوسائط المغذية السائلة.في الوسائط المغذية السائلة، تكون طبيعة النمو الميكروبي أقل تنوعًا منها في الوسائط المغذية الصلبة. ومع ذلك، تم أيضًا تحديد الأشكال التالية من نمو البكتيريا هنا.

1. نمو البكتيريا مع تعكر موحد للوسط الذي يظل لونه دون تغيير أو يتغير وفقًا للون الصبغة القابلة للذوبان في الماء والتي تكونت في ثقافة الميكروب. هذا النمو هو سمة من سمات العديد من البكتيريا المسببة للأمراض التي تنتمي إلى مجموعة اللاهوائيات الاختيارية.

2. النمو القاعي تتميز البكتيريا بتكوين راسب في قاع أنبوب الاختبار مع وسط مغذي سائل. قد تكون الرواسب هزيلة أو وفيرة، أو متفتتة، أو متجانسة، أو ليفية، أو على شكل رقائق فضفاضة كبيرة، أو لزجة، أو لزجة، أو هشة أو فطيرة في الاتساق. قد يكون الوسط المغذي فوق الرواسب واضحًا أو غائمًا. يتم تحديد لون الراسب والوسط الموجود فوقه من خلال وجود صبغة تنتجها الثقافة الميكروبية. إذا لم تشكل الثقافة صبغة، فإن لون الوسط لا يتغير، ويصبح الراسب، كقاعدة عامة، أبيض رمادي أو اللون مصفر. النمو السفلي خاص بالبكتيريا ذات التنفس اللاهوائي.

3. النمو الجداري يتم التعبير عن البكتيريا في حقيقة أن الوسط المغذي الموجود في أنبوب الاختبار يظل شفافًا تمامًا. تنمو البكتيريا، وتشكل رقائق فضفاضة كبيرة إلى حد ما أو، على العكس من ذلك، حبيبات مدمجة متصلة بالسطح الداخلي لجدران الوعاء، والتي، اعتمادا على نوع البكتيريا، يتم إزالتها بسهولة أو بصعوبة.

4. نمو السطح تتميز البكتيريا بظهور طبقة على سطح وسط غذائي سائل، يمكن أن يختلف مظهرها وطبيعتها:

أ) الفيلم رقيق وحساس وعديم اللون وله مظهر لوحة بالكاد ملحوظة تختفي عند رج الأنبوب وتحريك الوسط؛

ب) الفيلم رطب، سميك، مرئي بوضوح للعين المجردة، لزج، قوام لزج، يلتصق بالحلقة ويمتد خلفها؛

ج) يكون الفيلم كثيفًا وجافًا ويشبه قطع الجلد، وعندما تحاول أخذ مادة منه تتم إزالته بالكامل على شكل قرص مستدير يتوافق مع قطر أنبوب الاختبار:

د) الفيلم كثيف وجاف وذو سطح متجعد وأحيانًا ثؤلولي وملتصق بجدران الوعاء بحوافه ؛ عند رج السائل أو ملامسة الحلقة البكتيرية، فإنه يتكسر إلى قطع تغوص في عمق السائل.

يعتمد لون الفيلم، مثل وسط النمو، على الصبغة التي تنتجها ثقافة الميكروبات المتنامية. إن نمو البكتيريا على شكل طبقة سطحية هو سمة من سمات الميكروبات الهوائية.

النمو على وسط غذائي شبه سائل.للتعرف على سمات النمو الميكروبي على وسط غذائي شبه سائل، يتم بذر الثقافة قيد الدراسة في عمود يحتوي على أجار شبه سائل بنسبة 0.2-0.5%. لكي تظهر سمات النمو بشكل أوضح، يتم ثقب الوسط على مقربة من جدار أنبوب الاختبار. البذر الذي يتم إنتاجه بهذه الطريقة يجعل من الممكن التعرف على الأجناس المتنقلة للميكروبات وتمييزها عن الأجناس غير المتحركة.

تسبب الميكروبات المتنقلة الموجودة في عمود من الأجار شبه السائل تعكرًا واضحًا، وتنتشر بشكل متساوٍ تقريبًا في جميع أنحاء سمك الوسط بأكمله.

تنمو الأشكال غير المتحركة من الميكروبات فقط على طول ثقب الوسط، مما يشبه رقاقات الثلج الأسطوانية أو المخروطية. وفي الوقت نفسه، تظل البيئة شفافة تمامًا.

الدرس 7. طرق دراسة الخواص البيوكيميائية للكائنات الحية الدقيقة.

الغرض من الدرس. دراسة التمايز الكيميائي الحيوي للكائنات الحية الدقيقة.

المواد والمعدات. مجموعة من الوسائط المغذية. الثقافة المدروسة للكائنات الحية الدقيقة.

طرق دراسة الخواص البيوكيميائية للكائنات الحية الدقيقة

تلعب الإنزيمات دورًا مهمًا في حياة الميكروبات. إنهم مشاركين إلزاميون في التفاعلات الكيميائية الحيوية المختلفة التي تكمن وراء وظائف التغذية والتنفس والتكاثر. ينتج كل نوع من الكائنات الحية الدقيقة مجموعة ثابتة من الإنزيمات له، بعضها يقوم بتكسير البروتينات والكربوهيدرات بدرجات متفاوتة، بينما يتسبب البعض الآخر في أكسدة واختزال الركائز المختلفة. إن استقرار الأنظمة الأنزيمية البكتيرية يجعل من الممكن استخدام الخصائص الكيميائية الحيوية للبكتيريا مع خصائصها المورفولوجية والثقافية وغيرها من السمات الثابتة لتحديد أنواع وأنواع البكتيريا. للكشف عن الإنزيمات، يتم زرع بذور ثقافة الميكروبات قيد الدراسة على وسائط مغذية تشخيصية تفاضلية خاصة.

خصائص السكاروليتيك للكائنات الحية الدقيقة. إن القدرة على تكسير الكربوهيدرات والكحوليات عالية الذرات، والتي عادة ما يتم دمجها في مجموعة واحدة تسمى السكريات، هي أمر متأصل في العديد من الميكروبات. تحت تأثير الإنزيمات المحللة للسكر في البكتيريا، يتم تقسيم السكريات إلى الألدهيدات والأحماض. المنتجات النهائية لتقسيمها هي مواد غازية: ثاني أكسيد الكربون وH2. ومن المميز أن أنواع مختلفةوحتى أنواع مختلفة من الميكروبات تتعامل مع نفس السكريات بشكل مختلف. لذلك، على سبيل المثال، تظل بعض البكتيريا، التي تخمر اللاكتوز، محايدة فيما يتعلق بالجلوكوز، والبعض الآخر، على العكس من ذلك، تخمر الجلوكوز، والثالثة، الأكثر نشاطا، تسبب انهيار كل من الجلوكوز واللاكتوز. للكشف عن الإنزيمات المحللة للسكر، يتم تلقيح مزرعة البكتيريا المدروسة في وسط المغذيات Hiss، والذي يسمى أيضًا الصف "المتنوع". عادةً ما يحتوي صف "موتلي" Hiss القصير على 5 أنابيب اختبار: مع الجلوكوز واللاكتوز والمانيتول والمالتوز والسكروز. في بعض الدراسات، لإجراء دراسة أكثر تعمقًا للخصائص الكيميائية الحيوية للميكروب المعزول، يتم استكمال سلسلة Hiss بالدولسيتول، والسوربيتول، والزيلوز، والأرابينوز، وبعض السكريات الأخرى. يرجع اسم السلسلة "المتنوعة" إلى حقيقة أنه تحت تأثير الإنزيمات الميكروبية، تظل بعض الكربوهيدرات دون تغيير، وبالتالي لا يتغير لون الوسط الغذائي، بينما تتحلل السكريات الأخرى لتشكل منتجات تحلل حمضية تتغير لون المؤشر وبالتالي لون الوسط المغذي. وسائط الهسهسة سائلة وشبه سائلة (مع إضافة 0.2-0.5٪ أجار أجار). في أنابيب الاختبار ذات الوسائط السائلة من Giss للكشف عن الغازات، وهي المنتجات النهائية لتحلل السكريات، يتم إنزال "العوامة" - أنبوب يبلغ قطره 0.5-0.7 سم، مغلقًا من أحد طرفيه. يتم وضع "التعويم" مع نهاية ملحوم؛ أثناء التعقيم، يتم ملؤها بالكامل بوسط غذائي. عندما تتشكل منتجات غازية في الوسط، فإنها تحل محل جزء من السائل في "الطفو"، ونتيجة لذلك تتجمع فقاعة الهواء في نهايتها المغلقة. في وسط الهيس شبه السائل، يتم تحديد تكوين الغاز من خلال وجود فقاعات غازية صغيرة في سمك الوسط والرغوة المستمرة على سطحه. وهكذا، عند دراسة الإنزيمات المحللة للسكر التي تفرزها الميكروبات، لا يأخذ المرء في الاعتبار فقط ظاهرة انهيار بعض السكريات عن طريق تكوين الحمض، ولكن أيضًا عمق العملية الأنزيمية من خلال وجود منتجات غازية نهائية في الوسط المغذي. يتم وضع أنابيب الاختبار مع مجموعة من وسائط Hiss في حامل في صف واحد. يتم تسمية كل أنبوب اختبار باسم السكر الموجود في الوسط. في أنبوب الاختبار الأول من كل صف، بالإضافة إلى اسم السكر، قم بالإشارة إلى عدد أو نوع المزرعة الميكروبية قيد الدراسة. يتم أخذ الثقافة عند طرف الحلقة بكمية صغيرة جدًا ويتم زرعها وفقًا للطريقة المقبولة عمومًا.

خصائص التحلل البروتيني للكائنات الحية الدقيقة. تنتج بعض أنواع الكائنات الحية الدقيقة وتفرز في البيئة الخارجية إنزيمات بروتينية - البروتياز التي تحفز تحلل البروتينات. نتيجة لتقسيم جزيء البروتين، يتم تشكيل منتجات التحلل المتوسطة الجزيئية العالية - الببتونات، الألبومات والببتيدات. تحت تأثير الإنزيمات المحللة للبروتين الأخرى، تنقسم الببتونات بدورها إلى عديدات الببتيد (مركبات مكونة من اثنين أو أكثر من الأحماض الأمينية) وأحماض أمينية فردية. لتحديد الإنزيمات المحللة للبروتين، يتم تلقيح مزرعة الميكروب قيد الدراسة في وسط غذائي يحتوي على بروتين أو آخر. في أغلب الأحيان، يتم استخدام الجيلاتين لهذا الغرض، وفي كثير من الأحيان أقل - مصل اللبن الرائب، بياض البيض المتخثر، الحليب أو قطع اللحم المسلوق. إن نشاط التحلل البروتيني لنفس الميكروب، عند تحديده على وسائط مغذية مختلفة، سيظهر بشكل مختلف، وذلك بسبب خصوصية الإنزيمات. لذلك، بالنسبة لأنواع مختلفة من الميكروبات، يوصى باستخدام الوسائط المغذية ذات التركيبة المختلفة.

تحديد نشاط التحلل البروتيني للميكروبات

أ) الجيلاتين. يُسكب جيلاتين ببتون اللحم في أنابيب اختبار في عمود سعة 5-6 مل. يتم البذر عن طريق الحقن، وغمر الحلقة مع الثقافة قيد الدراسة في عمق الوسط المغذي إلى أسفل الأنبوب. تُترك الميكروبات القادرة على النمو في درجات حرارة منخفضة في غرفة بدرجة حرارة 20-22 درجة مئوية. يتم تحضين باقي المحاصيل في منظم حرارة عند 37 درجة مئوية. جنبا إلى جنب مع أنابيب الاختبار التجريبية، يتم وضع واحد أو اثنين من أنابيب الاختبار مع الجيلاتين غير الملقحة في منظم الحرارة للتحكم. عند درجة حرارة 37 درجة مئوية، يذوب الجيلاتين، لذلك بعد الحضانة، يتم إنزال أنابيب الاختبار التي تم إزالتها من منظم الحرارة في الماء البارد أو وضعها في الثلاجة. بعد أن يتبلور الجيلاتين الموجود في أنابيب اختبار التحكم، يبدأون في رؤية النمو ويأخذون في الاعتبار التغيرات في الوسط المغذي لأنابيب الاختبار. حيث، تحت تأثير إنزيم الجيلاتيناز، تتحلل بروتينات الجيلاتين، ويتم إسالة الوسط الغذائي. يتم ترك أنابيب الاختبار التي يظل فيها الوسط دون تغيير بعد الحضانة اليومية في منظم الحرارة، ويتم مراقبة التغير في الوسط لمدة 20 يومًا. في بروتوكول الدراسة يجب ملاحظة يوم ظهور علامات تميع الوسط ودرجة وطبيعة تميعه.

ب) على أجار حليب أيكمان. يتم سكب أجار حليب إيكمان وتبريده في أطباق بيتري، ويتم تلقيحه بمستنبتات الميكروبات المدروسة. يتم البذر باستخدام حلقة أو ملعقة للحصول على مستعمرات معزولة. بعد 24-48 ساعة من الحضانة في منظم الحرارة، تتسبب الثقافات التي تنتج إنزيمًا محللًا للبروتين في تحلل بروتين الحليب - الكازين، ونتيجة لذلك يتم تشكيل مناطق شفافة حول هذه المستعمرات، والتي تبرز بوضوح على الخلفية اللبنية الغائمة العامة للثدي. واسطة.

ج) على مصل الدم المتجلط. يتم تلقيح ثقافة الميكروبات الهوائية المدروسة في أكواب، والميكروبات اللاهوائية - عن طريق الحقن في عمود من مصل الحصان المتخثر، المحتضن في منظم حرارة عند 37 درجة مئوية. السلالات التي تنتج الإنزيمات المحللة للبروتين، وتخفف الوسط المغذي، تشكل منخفضات حول المستعمرات أو على سطح العمود المتوسط.

د) في مرق الدجاج بياض البيضة. في أنبوب اختبار يحتوي على مرق ببتون اللحم أو مرق هوتينجر الذي يحتوي على قطعة من بروتين الدجاج المطوي، يتم إدخال حلقة واحدة من مزرعة الميكروب قيد الدراسة. يتم عرض المحاصيل يوميا لمدة 5 أيام. تقوم مزارع الميكروبات النشطة بروتينيًا بتكسير بياض البيض المتخثر. يتناقص حجم قطع البروتين الموجودة في الوسط بشكل ملحوظ، وتتحول إلى كتلة متفتتة، أو تذوب تمامًا. وبالمثل، تتجلى خصائص التحلل البروتيني للميكروبات في الوسائط مع قطعة من اللحم المسلوق.

بعض أنواع الميكروبات المسببة للأمراض ذات النشاط البروتيني الواضح لديها القدرة على تحطيم البروتين والببتون إلى منتجات التحلل العميق: الإندول وكبريتيد الهيدروجين واليوريا والأمونيا. عند تحديد أنواع وتمايز أصناف الميكروبات المسببة للأمراض، فإن تحديد المنتجين الأولين: الإندول وكبريتيد الهيدروجين له أهمية قصوى.

تحديد الإندول في ثقافة الكائنات الحية الدقيقة. يتكون الإندول من تحلل حمض الحلقي غير المتجانس المعقد - التربتوفان. للكشف عن تكوين الإندول، يتم تلقيح حلقة من المزرعة قيد الدراسة في وسط ستروجوف أو الوسائط الأخرى الموصى بها للكشف عن الإندول. مباشرة بعد التلقيح، يتم إدخال شريط من ورقة المؤشر المشربة بمحلول حمض الأكساليك في أنبوب الاختبار بحيث لا تلمس ورقة المؤشر الوسط المغذي. للقيام بذلك، يتم الضغط على الثلث العلوي من شريط الورق مع الفلين على جدار أنبوب الاختبار. يتم تحضين المحاصيل لمدة 24-48 ساعة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. يتم تحديد تكوين الإندول من خلال تلوين الطرف السفلي من ورقة المؤشر باللون الوردي الفاتح، والذي يمكن رؤيته بوضوح في الضوء المنقول.

تعريف كبريتيد الهيدروجين. كبريتيد الهيدروجين هو المنتج النهائي لتحلل الأحماض الأمينية: السيستين والسيستين والميثيونين التي تحتوي على الكبريت. يتم تلقيح حلقة من المزرعة الميكروبية المدروسة في أنبوب اختبار بمرق ببتون اللحم أو مرق هوتينجر. مباشرة بعد التلقيح، يضاف شريط من ورقة المؤشر المشربة بخلات الرصاص إلى أنبوب الاختبار لتقدير كبريتيد الهيدروجين. في الحالات الإيجابية، يتحد كبريتيد الهيدروجين المتكون في المزرعة مع خلات الرصاص عديمة اللون ويتحول إلى كبريتات الرصاص، مما يعطي ورقة المؤشر لونًا أسود-بني.

يتم إجراء المحاسبة النهائية لنتائج تكوين الإندول وكبريتيد الهيدروجين في اليوم 7-10 بعد البذر، حيث أن عملية الانقسام الأنزيمي للبروتين وتكوين المنتجات النهائية للتحلل تحدث أحيانًا لفترة طويلة.

خصائص الأكسدة والاختزال في الكائنات الحية الدقيقة. يمكن العثور على إنزيمات الأكسدة والاختزال المرتبطة بشكل رئيسي بوظيفة الجهاز التنفسي للكائنات الحية الدقيقة في الثقافة الميكروبية. كما هو معروف، يمكن أن تتم عملية أكسدة الركيزة عن طريق ربط الأكسجين بها بمشاركة إنزيمات الأكسيداز أو عن طريق إزالة الهيدروجين منها بمشاركة إنزيمات ديهيدراز. يتميز هذا النوع من التفاعل بحقيقة أن أكسدة مادة واحدة تكون مصحوبة دائمًا باختزال (اختزال) مادة عضوية أخرى. تسمى المادة الأولى التي ينقسم منها الهيدروجين بالمتبرع، والمادة التي يرتبط بها تسمى بالمستقبل. غالبًا ما يكون مستقبل الهيدروجين هو أكسجين الهواء، ولكنه قد يكون أيضًا العديد من المركبات العضوية التي يمكن أكسدتها واختزالها بسهولة. من أجل التعرف على إنزيمات ديهيدريز وتحديد نشاطها في ممارسة البحوث الميكروبيولوجية، تم اقتراح طريقة تعتمد على إدخال صبغة عضوية في وسط المغذيات، والتي تعمل كمستقبل للهيدروجين. ونتيجة إضافة الهيدروجين تقل الصبغة وتتحول إلى مركب عديم اللون يسمى الليكوباز. مع وصول الأكسجين بكثرة، يمكن أن يتأكسد مرة أخرى ويكتسب لونه السابق. كمستقبل للهيدروجين، يتم استخدام أزرق الميثيلين، صبغة عباد الشمس، الملكيت الأخضر، القرمزي النيلي، الأحمر المحايد، إلخ.للكشف عن خصائص الاختزال للكائنات الحية الدقيقة، تضاف هذه الأصباغ إلى الوسائط المغذية المعتادة: مرق ببتون اللحوم، اللحوم- أجار الببتون، الحليب. نفس النوع من الميكروب يتصرف بشكل مختلف فيما يتعلق بالدهانات ذات التركيب المختلف. تُستخدم خاصية الميكروب هذه في الممارسة الميكروبيولوجية كميزة تفاضلية. تقلل بكتيريا التيفوئيد من لون أزرق الميثيلين ولكنها لا تقلل من عباد الشمس ولا تغير اللون الأحمر المحايد، على عكس الإشريكية القولونية التي تظل محايدة لأزرق الميثيلين ولكنها تقلل من عباد الشمس والأحمر المحايد.

تحديد القدرة على التخفيض.

1. في 5 مل من الوسط - الحليب مع الميثيلين الأزرق - قم بتلقيح حلقة من المزرعة المدروسة من وسط مغذي كثيف أو 0.1 مل من مزرعة مرق لمدة 18 ساعة، وبعد ساعة من الحضانة، تؤخذ نتائج النمو في الاعتبار حساب. مع رد فعل إيجابي على تقليل أزرق الميثيلين، يتحول الوسط من اللون الأزرق إلى اللون الكريمي، ومع رد فعل إيجابي ضعيف، يكتسب لونًا مخضرًا.

2. يتم تلقيح أنابيب الاختبار بحليب عباد الشمس، وسط مينكيفيتش، بنفس طريقة تلقيح الحليب بأزرق الميثيلين، وهو مستنبت يومي من وسط مغذي كثيف أو سائل. يتم تحضين المحاصيل في منظم الحرارة لمدة 10 أيام، مع ملاحظة التغير في لون الوسط يوميًا. يتجلى انخفاض عباد الشمس في تغير لون الحليب بالكامل، والذي يحتوي على لون أرجواني وردي قبل البذر. في بروتوكول الدراسة، يُشار إلى تقليل عباد الشمس بالحرف P.

يتيح وسط مينكيفيتش أيضًا اكتشاف تكوين الأحماض أو القلويات، والذي يتم التعبير عنه، على التوالي، في احمرار أو زرقة بيئة الحليب. يُشار إلى تكوين الحمض بالحرف K، والقلويات بالحرف W.

تحديد إنزيم الكاتالاز. بعض أنواع الكائنات الحية الدقيقة التي تنتمي إلى مجموعة الكائنات الهوائية، تشكل في عملية التنفس بيروكسيد الهيدروجين، وهو سم خلوي. لا تصل كمية بيروكسيد الهيدروجين في المزرعة إلى تركيزات عالية أبدًا، لأنه عند تكوينها، يتحلل البيروكسيد إلى ماء وأكسجين جزيئي بمشاركة إنزيم الكاتلاز. على سطح المزرعة الميكروبية المزروعة على وسط غذائي كثيف في طبق بيتري، يتم وضع 1-2 مل من محلول بيروكسيد الهيدروجين 1٪ بحيث يغطي سطح المزرعة بطبقة رقيقة. يشير ظهور فقاعات الغاز في طبقة السائل المطبق إلى تكوين الأكسجين نتيجة لتقسيم بيروكسيد الهيدروجين تحت تأثير الكاتلاز. تم وضع علامة على نتيجة مماثلة في بروتوكول التجربة بعلامة + كنتيجة إيجابية للتفاعل مع الكاتلاز.

الدرس 8. طرق البحث الميكروبيولوجي للمياه والهواء والتربة.

هدفالطبقات.تعرف على قواعد أخذ وإرسال عينات المياه والتربة للبحث. حدد العدد الإجمالي للكائنات الحية الدقيقة في 1 جم أو 1 مل. فحص الهواء عن طريق الترسيب (طريقة كوخ).

المعدات والمواد.قوارير معقمة ذات سدادة، وأنابيب اختبار تحتوي كل منها على 9 مل من الماء المعقم، وأطباق بتري معقمة ملفوفة بالورق. ماصات معقمة (2 مل لكل منهما). أنابيب تحتوي على MPA المنصهر، سعة كل منها 12 مل. الحلقات الميكروبيولوجية. الشرائح والأغطية. حل لوغول. زيت الأرز. الشعلات.

تعد زراعة البكتيريا المختلفة واحدة من أكثر الطرق فعالية واستخدامًا على نطاق واسع، والتي تستخدم حاليًا بنشاط في مجال علم الأحياء الدقيقة الطبية. كما أن هذه الطريقة لا غنى عنها في مجال التكنولوجيا الحيوية، حيث تلعب دورا هاما في دراسة الخصائص المختلفة ذات الطبيعة البيولوجية والكيميائية الحيوية. تشير هذه الطريقة إلى عملية زراعة الكائنات المجهرية باستخدام تلك التي تختلف في خصائصها وخصائصها.

يمكن إجراء الثقافات البكتريولوجية بغرض إجراء فحص شامل للخلايا المنفصلة في العين والأعضاء التناسلية البشرية، بالإضافة إلى التحليل الأكثر دقة للدم أو البول أو البراز. يتم أيضًا إجراء الثقافات البكتيرية للسائل المنوي والبلغم لأغراض البحث. في كثير من الأحيان يكون هناك إجراء للبذر.

ما هي البيئات التي تتغذى فيها البكتيريا؟

عند اختيار وسيلة للبذر، فمن الضروري أولا وقبل كل شيء التركيز على طبيعة المحتوى المتأصل في البكتيريا، والتي هي الموضوع الرئيسي للدراسة. في حالة ضرورة الحصول على عزلة وكذلك تحديد ثقافة نقية، يجب إجراء التلقيح على وسائط مغذية كثيفة.

لكن إذا كانت المادة المراد فحصها لا تحتوي على عدد كبير جداً من الكائنات الحية الدقيقة، فيمكن استخدام وسط غذائي سائل لهذا الغرض.

هناك عدة أنواع من الوسائط المغذية التي يتم فيها إجراء الثقافة البكتيرية. لذلك، من المعتاد التمييز بين البيئات البسيطة والخاصة، وكذلك التشخيص الاختياري والتفاضلي. كل فئة من وسائل الإعلام لها خاصة بها الميزات الفرديةوالخصائص.

في أي الحالات يوصف للمرضى تحليل البول مع ثقافة البكتيريا؟

يعد التحليل باستخدام ثقافة البول البكتيرية ذا صلة في عدة حالات:

• في وجود الأمراض المعدية في الجهاز البولي.
• مع داء السكري.
• أثناء الحمل؛
• من أجل توضيح التشخيص، إذا كان المرض غير نمطي.

يتطلب هذا النوع من التحليل حصة صباحية من بول المريض، تتراوح الكمية التقريبية منها من ثلاثة إلى خمسة ملليلتر. قبل جمع البول للتحليل، يجب على المريض بالضرورة تنفيذ إجراءات النظافة المناسبة، ولكن من المستحيل استخدام المنتجات ذات الخصائص المطهرة. يجب أن يتم تسليم البول المجمع للتحليل في أسرع وقت ممكن. ولهذا الغرض، يتم استخدام حاوية معقمة يمكن التخلص منها، مما يضمن النقل الصحيح وأدق النتائج.