لتحديد حساسية الميكروبات للمضادات الحيوية ، هناك عدد من الطرق ، من بينها أكثرها شيوعًا: طريقة التخفيف المتسلسل في وسط مغذي سائل أو أجار مغذي ، طريقة نشر أجار (طريقة الأقراص المشبعة بالمضادات الحيوية) و عدد من الطرق المتسارعة.
يتم تحديد حساسية الميكروبات للمضادات الحيوية في المختبر في ظل ظروف تختلف اختلافًا كبيرًا عن تلك التي يعمل فيها الدواء في الجسم. تتأثر نتائجها بشكل كبير بعوامل مثل التركيب ودرجة الحموضة لوسط المغذيات ، وحجم جرعة التلقيح ، وعمر الثقافة ، وظروف الزراعة ، وما إلى ذلك. عند استخدام طريقة نشر الأجار ، تكون نتائج البحث تتأثر بسماكة طبقة وسط المغذيات ، ورطوبتها ، ومعدل انتشار المضادات الحيوية ، ومعدل نمو الكائنات الحية الدقيقة المدروسة ، وما إلى ذلك. طريقة انتشار الأجار (طريقة القرص الورقي) هي الأبسط والأكثر استخدامًا ، ولكن نوعي فقط. طريقة التخفيف المتسلسل لمضاد حيوي في وسط مغذي في ظل ظروف تجريبية قياسية هي طريقة كمية أكثر موثوقية ودقة.
طريقة التخفيف التسلسلي
من الدلائل على تحديد الحساسية بواسطة طريقة التخفيف المتسلسل الحاجة إلى الحصول على بيانات كمية (بشكل رئيسي في العمليات الشديدة) للعلاج بالمضادات الحيوية الخاضعة للرقابة (تطوير أنظمة الإدارة).
إن تحديد درجة الحساسية لعدد من الأدوية المضادة للبكتيريا للميكروب الذي يسبب العملية المعدية يؤثر على اختيار المضاد الحيوي (رفض الأدوية التي تتميز بسمية عالية نسبيًا مع حساسية معتدلة لمسببات الأمراض تجاهها) ، جرعتها (تركيز الجراثيم). يجب أن يكون المضاد الحيوي في الدم أعلى بمقدار 2-3 مرات من MIC بالنسبة إلى العامل الممرض) وطريقة الإعطاء. يعد التحديد الكمي للحساسية ضروريًا أيضًا لتحديد نشاط مبيد الجراثيم للدواء المحدد (كضمان لتأثير علاجي سريع ودورة غير متكررة) فيما يتعلق بهذا العامل الممرض.
هناك نوعان من التعديلات على الطريقة - تحديد الميكروبات الحساسة للمضادات الحيوية على وسائط المغذيات السائلة والصلبة.
تتيح هذه الطريقة تحديد الحد الأدنى لتركيز المضادات الحيوية المثبطة للنمو (MIC) للسلالة المعزولة من العامل الممرض. يتكون من إعداد سلسلة من التخفيفات المتتالية للمضادات الحيوية في وسط غذائي مع إدخال جميع التخفيفات للمزرعة قيد الدراسة لقمع نمو ميكروب بتركيز معين من المضاد الحيوي في وسط غذائي ، درجة حساسية يتم الحكم على الكائنات الحية الدقيقة.
"العلاج بالمضادات الحيوية العقلانية"
S.M. Navashin ، I.P. Fomina
قد يكون فشل العلاج بالمضادات الحيوية أيضًا بسبب الاختيار الخاطئ للجرعات وطرق تناول الدواء ، وتأخر بدء العلاج ، واستخدام المضادات الحيوية بجرعات منخفضة في العلاج المركب ، ومدة العلاج غير الكافية ، وما إلى ذلك. إمكانية تعطيل المضادات الحيوية عن طريق أنظمة إنزيمات الجسم ، ارتباط البروتينات لا تؤخذ دائمًا في الاعتبار. الدم والأنسجة ، الكتل النخرية ، إلخ. نتائج غير مرضية للعلاج باستخدام ...
تتضمن الطرق المعجلة لتحديد الحساسية طريقة تكتشف تكوين الأشكال اللاإرادية للبكتيريا تحت تأثير مضاد حيوي أثناء الفحص المجهري الطوري. تتشكل الأشكال اللاإرادية للكائنات الدقيقة في وجود تراكيز جراثيم للمضاد الحيوي. في حالة عدم وجوده ، تحت تأثير تركيزات تحت الجراثيم ، وكذلك مع مقاومة السلالة المدروسة للدواء ، تنمو المستعمرات الطبيعية. التغيرات المورفولوجية في الثقافات المدروسة تحت تأثير مضاد حيوي ...
في حالة حساسية المضادات الحيوية لسلالة الممرض ، لا يحدث تخمير الجلوكوز عند زراعته على وسط يحتوي على الجلوكوز ، الفينول الأحمر (كمؤشر) وتركيزات معينة من المضاد الحيوي. في هذه الحالة ، يتحول الوسط إلى اللون الأرجواني بسبب قلونه. يشير التغير في اللون الأحمر المتوسط إلى الأصفر إلى انهيار الجلوكوز مع تكوين الحمض نتيجة نمو سلالة مقاومة ...
في إنجلترا ، لا تزال طريقة الأخدود التي اقترحها Flemming مستخدمة. لتحديد حساسية الميكروبات للمضادات الحيوية بهذه الطريقة ، يتم قطع شريط في طبق أجار للحصول على أخدود ، ثم يتم تلقيح سلالات الميكروبات المختبرة بضربة عمودية على الأخدود. يمتلئ التجويف بالأجار ، ويتم صهره وتبريده إلى 35-60 درجة مئوية ، ويحتوي على تركيزات معينة من المضاد الحيوي. بسبب انتشار المضاد الحيوي في وسط المغذيات ...
يشير عدم وجود منطقة من تثبيط نمو الميكروبات حول القرص إلى أن السلالة المختبرة غير حساسة لهذا المضاد الحيوي ؛ مع منطقة بقطر يصل إلى 10 مم ، تعتبر السلالة غير حساسة. لا يتم حساب المستعمرات المفردة أو طبقة رقيقة من النمو داخل منطقة التقزم. قد يختلف حجم المناطق اعتمادًا على سمك طبقة الأجار ، وكثافة العشب الميكروبي ، وتكوين الوسط. لكن…
لتقليل نطاق الاختبار ، يجب استخدام مجموعات الأقراص ، مع مراعاة نوع العامل الممرض المعزول وموقع الإصابة (انظر الجدول أدناه). مجموعات أساسية من أقراص المضادات الحيوية موصى بها لاختبار الحساسية اعتمادًا على نوع المزرعة المعزولة والمواد المرضية.
للتحكم في دقة ومعايير البحث في كل تجربة ، من الضروري استخدام ثقافات اختبار ذات حساسية معروفة للمضادات الحيوية. توصي منظمة الصحة العالمية بثلاث ثقافات من مجموعة الثقافة الأمريكية لهذا الغرض: Escherichia coli (ATCC 25922) ، Staphylococcus aureus (ATCC 25923) ، Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853). عند تحديد حساسية مسببات الأمراض المعزولة ، من الضروري إجراء تحليل تحكم بقياس مناطق تثبيط النمو ...
تحضير الأطباق وسط أجار ذائب (مرق هوتينجر هضم يحتوي على 120-140 مجم ٪ نيتروجين أمين - 1000 مل ؛ تافوينسكي أجار أجار - 15 جم ، فوسفات الصوديوم ثنائي القاعدة - 3 جم ، درجة الحموضة بعد التعقيم 7.0-7.2) يتم سكبها في جرعات 20 مل في أطباق بتري المعقمة التي يبلغ قطرها 100 مم ، وتقع على سطح أفقي. قبل الإصابة ، يتم تجفيف سطح الوسط المجمد من أجل ...
من بين طريقتين لتحديد حساسية الميكروبات للمضادات الحيوية (في الوسائط السائلة والصلبة) ، تكون طريقة سلسلة التخفيف في وسط سائل أكثر دقة. النتائج التي تم الحصول عليها في تحديد الحساسية في وسط المغذيات الصلبة أقل اتساقًا. لا ينبغي استخدام طريقة تخفيف الآجار لتقييم قابلية الميكروبات التي تنتج نموًا رقيقًا متناثرًا (المكورات العقدية ، المكورات الرئوية) أو تنتشر على نطاق واسع على السطح ...
اعتمادًا على حجم جرعة البذر ، قد تتقلب قيمة MIC للمضاد الحيوي: مع زيادة الجرعة ، تنخفض الحساسية بسبب زيادة كمية البنسليناز التي تشكلها المكورات العنقودية في الوسط. يتم تحضين الأنابيب عند 37 درجة مئوية لمدة 18-24 ساعة ، وتؤخذ النتائج في الاعتبار من خلال تحديد وجود أو عدم وجود نمو جرثومي في وسط يحتوي على تخفيفات مختلفة من المضاد الحيوي. آخر أنبوب توقف (مرق صاف) ...
بعض مسببات الأمراض المعدية مع اكتشاف المضادات الحيوية قد غيرت قليلاً من طبيعة الحساسية الأولية لهذه الأدوية (العقديات المجموعة أ ، المكورات الرئوية ، المكورات السحائية ، البروسيلا ، بعض السالمونيلا).
في الوقت نفسه ، اكتسبت معظم الميكروبات المسببة للأمراض مقاومة بمرور الوقت للعوامل المضادة للميكروبات على نطاق واسع ، وأحيانًا غير خاضعة للرقابة وغير معقولة. تعتبر مشكلة المقاومة الميكروبية ذات أهمية قصوى فيما يتعلق بالمكورات العنقودية ، الشيغيلة ، الإشريكية ، المتقلبة ، ومن بينها السلالات المقاومة للمضادات الحيوية التي يتم عزلها بأكبر عدد من الترددات.
حسب درجة الحساسية للمضادات الحيوية الرئيسية ، تنقسم الميكروبات إلى حساسة ، متوسطة الحساسية ومقاومة. تشمل مجموعة الحساسية معظم سلالات الكائنات الحية الدقيقة التي يتوقف نموها على وسط المغذيات عند استخدام التركيزات المقابلة لمتوسط الجرعات العلاجية للمضادات الحيوية. إذا تم قمعه عند استخدام الجرعات القصوى فقط من الأدوية ، فإن هذه الكائنات الدقيقة تكون حساسة بشكل معتدل للمضادات الحيوية. إذا تم تحقيق تثبيط النمو في التجربة المعملية فقط بتركيزات عالية جدًا من الدواء ، والتي لا يمكن إنشاؤها في الجسم ، يتم تصنيف هذه العوامل المعدية على أنها مقاومة للمضاد الحيوي.
لتحديد حساسية الميكروبات للمضادات الحيوية ، هناك عدد من الطرق: طريقة التخفيف المتسلسل في وسط المغذيات السائلة أو أجار المغذيات ، وطريقة انتشار الأجار (طريقة الأقراص المشبعة بالمضادات الحيوية) والطرق المتسارعة. طريقة القرص بسيطة ومستخدمة على نطاق واسع ولكنها تعطي إجابة نوعية فقط. الطريقة الكمية الأكثر موثوقية ودقة هي طريقة التخفيف المتسلسل للمضادات الحيوية في وسط مغذي في ظل ظروف تجريبية قياسية. في معظم الحالات ، يكون ارتباط البيانات المختبرية بالبيانات السريرية كاملًا تمامًا ، ويكون العلاج فعالًا عند الدراسة في الديناميكيات ليس فقط المسار السريري للعملية ، ولكن أيضًا التغيير المحتمل في العامل الممرض أو حساسيته للمضادات الحيوية.
يعد تركيز المضادات الحيوية في الأنسجة وسوائل الجسم ، فضلاً عن نشاطها كمضاد للميكروبات ، من بين العوامل الرئيسية التي تحدد فعالية العلاج بالمضادات الحيوية. في دراستها ، تُستخدم على نطاق واسع طرق البحث الميكروبيولوجية القائمة على قدرة المضاد الحيوي على إعاقة نمو ميكروب الاختبار.
لتحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية (المضادات الحيوية) ، عادة ما يتم استخدام ما يلي:
طريقة انتشار أجار . يتم تلقيح الميكروب المدروس على وسط مغذي أجار ، ثم يتم إضافة المضادات الحيوية. عادة ، يتم تطبيق الأدوية إما على آبار خاصة في الأجار ، أو يتم وضع أقراص تحتوي على مضادات حيوية على سطح البذرة ("طريقة القرص"). يتم تسجيل النتائج في يوم واحد من خلال وجود أو عدم وجود نمو جرثومي حول الثقوب (الأقراص).
تعتبر طريقة القرص نوعيًا وتسمح لك بتقييم ما إذا كان الميكروب حساسًا أو مقاومًا للدواء.
طرق تحديد الحد الأدنى من التركيزات المثبطة والجراثيم ، أي الحد الأدنى من المضاد الحيوي الذي يسمح في المختبر بمنع النمو المرئي للميكروبات في وسط غذائي أو يعقمه تمامًا. هذه طرق كمية تسمح لك بحساب جرعة الدواء ، لأن تركيز المضاد الحيوي في الدم يجب أن يكون أعلى بكثير من الحد الأدنى للتركيز المثبط للعامل المعدي. إدخال جرعات كافية من الدواء ضروري ل علاج فعالوالوقاية من تكون الميكروبات المقاومة.
هناك طرق متسارعة باستخدام أجهزة التحليل الآلي.
تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية بطريقة القرص.تُزرع الثقافة البكتيرية المدروسة بعشب على أجار المغذيات أو وسط AGV في طبق بتري.
وسط AGV: مرق السمك الجاف المغذي ، أجار أجار ، فوسفات الصوديوم ثنائي القاعدة. يتم تحضير الوسط من مسحوق جاف وفقًا للتعليمات.
يتم وضع الأقراص الورقية التي تحتوي على جرعات معينة من المضادات الحيوية المختلفة على سطح البذور مع ملاقط على نفس المسافة من بعضها البعض. يتم تحضين الثقافات عند 37 درجة مئوية حتى اليوم التالي. وفقًا لقطر مناطق تثبيط النمو للثقافة البكتيرية المدروسة ، يتم الحكم على حساسيتها للمضادات الحيوية.
للحصول على نتائج موثوقة ، من الضروري استخدام الأقراص المعيارية ووسائط المغذيات ، للتحكم في استخدام السلالات المرجعية للكائنات الدقيقة ذات الصلة. لا توفر طريقة القرص بيانات موثوقة لتحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية متعددة الببتيد التي تنتشر بشكل سيئ في أجار (على سبيل المثال ، بوليميكسين ، ريستومايسين). إذا كانت هذه المضادات الحيوية ستستخدم للعلاج ، فمن المستحسن تحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة بطريقة التخفيف المتسلسل.
تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية بطريقة التخفيفات المتسلسلة.تحدد هذه الطريقة الحد الأدنى لتركيز المضاد الحيوي الذي يثبط نمو الثقافة البكتيرية المدروسة. أولاً ، يتم تحضير محلول مخزون يحتوي على تركيز محدد من المضاد الحيوي (ميكروغرام / مل أو وحدة دولية / مل) في محلول مذيب خاص أو محلول منظم. يتم تحضير جميع التخفيفات اللاحقة في المرق منه (بحجم 1 مل) ، وبعد ذلك يتم إضافة 0.1 مل من المعلق البكتيري المدروس الذي يحتوي على 10 6-10 7 خلايا بكتيرية لكل 1 مل إلى كل تخفيف. أضف 1 مل من المرق و 0.1 مل من المعلق البكتيري إلى الأنبوب الأخير (التحكم في الثقافة). يتم تحضين التطعيمات عند 37 درجة مئوية حتى اليوم التالي ، وبعد ذلك يتم ملاحظة نتائج التجربة على تعكر وسط المغذيات ، مقارنة مع التحكم في الثقافة. يشير الأنبوب الأخير الذي يحتوي على وسط غذائي شفاف إلى تأخر في نمو الثقافة البكتيرية المدروسة ، تحت تأثير الحد الأدنى من التركيز المثبط (MIC) للمضاد الحيوي الموجود فيه.
يتم تقييم نتائج تحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية وفقًا لجدول خاص جاهز يحتوي على القيم الحدودية لأقطار مناطق تثبيط النمو للسلالات المقاومة والحساسة والمقاومة المتوسطة ، وكذلك قيم MIC للمضادات الحيوية للسلالات المقاومة والحساسة.
تشمل السلالات الحساسة سلالات من الكائنات الحية الدقيقة التي يتم تثبيط نموها بتركيزات الدواء الموجودة في مصل دم المريض عند استخدام الجرعات العادية من المضادات الحيوية. تشمل السلالات المقاومة بشكل معتدل السلالات التي يتطلب تثبيط نموها تركيزات يتم تكوينها في مصل الدم عند إعطاء الجرعات القصوى من الدواء. الكائنات الحية الدقيقة مقاومة ، لا يثبط نموها بواسطة الدواء بالتركيزات التي تم إنشاؤها في الجسم عند استخدام الجرعات القصوى المسموح بها.
تحديد مضاد حيوي في الدم والبول وسوائل الجسم الأخرى.يتم وضع صفين من أنابيب الاختبار في رف. في إحداها ، يتم تحضير تخفيفات المضاد الحيوي المرجعي ، وفي الأخرى ، سائل الاختبار. بعد ذلك ، يتم إضافة تعليق بكتيريا الاختبار المحضرة في وسط Hiss مع الجلوكوز إلى كل أنبوب اختبار. عند تحديد البنسلين ، التتراسكلين ، الاريثروميسين في سائل الاختبار ، يتم استخدام سلالة قياسية من بكتيريا S. aureus كبكتيريا اختبار ، وعند تحديد الستربتومايسين ، يتم استخدام E. coli. بعد حضانة التطعيمات عند 37 درجة مئوية لمدة 18-20 ساعة ، لوحظت نتائج التجربة على تعكر الوسط وتلطيخه بمؤشر ناتج عن تحلل الجلوكوز بواسطة بكتيريا الاختبار. يتم تحديد تركيز المضاد الحيوي بضرب أعلى تخفيف لسائل الاختبار الذي يثبط نمو بكتيريا الاختبار بالحد الأدنى من تركيز المضاد الحيوي المرجعي الذي يثبط نمو نفس بكتيريا الاختبار. على سبيل المثال ، إذا كان الحد الأقصى لتخفيف سائل الاختبار الذي يثبط نمو بكتيريا الاختبار هو 1: 1024 ، وكان الحد الأدنى لتركيز المضاد الحيوي المرجعي الذي يثبط نمو نفس بكتيريا الاختبار هو 0.313 ميكروغرام / مل ، فإن منتج 1024x0.313 = 320 ميكروغرام / مل هو تركيز مضاد حيوي في 1 مل.
تحديد قدرة المكورات العنقودية الذهبية على إنتاج بيتا لاكتاماز.في دورق يحتوي على 0.5 مل من مزرعة مرق يومية من سلالة معيارية من المكورات العنقودية الحساسة للبنسلين ، أضف 20 مل من السائل المنصهر وتبريده إلى 45 درجة مئوية أجار المغذيات ، واخلطه واسكبه في طبق بتري. بعد تصلب الأجار ، يتم وضع قرص يحتوي على البنسلين في وسط الطبق على سطح الوسط. تزرع الثقافات المدروسة على طول نصف قطر القرص بحلقة. يتم تحضين التطعيمات عند 37 درجة مئوية حتى اليوم التالي ، وبعد ذلك يتم تدوين نتائج التجربة. يتم الحكم على قدرة البكتيريا المدروسة على إنتاج بيتا لاكتاماز من خلال وجود نمو سلالة معيارية من المكورات العنقودية حول واحدة أو أخرى من الثقافات المدروسة (حول القرص).
إرسال عملك الجيد في قاعدة المعرفة أمر بسيط. استخدم النموذج أدناه
سيكون الطلاب وطلاب الدراسات العليا والعلماء الشباب الذين يستخدمون قاعدة المعرفة في دراساتهم وعملهم ممتنين جدًا لك.
استضافت في http://www.allbest.ru/
مشروب غازيالصهيل
طرق تحديد الحساسية للمضادات الحيوية
تفسير نتائج الحساسية
الكائنات الدقيقة الحساسة (حساسة)
الكائنات الحية الدقيقة المقاومة (المقاومة)
الكائنات الحية الدقيقة ذات المقاومة المتوسطة (وسيطة)
مضادات حيوية
الأجهزة المستهدفة
الأدب
حاليًا ، في الممارسة السريرية ، هناك مبدأان لوصف الأدوية المضادة للبكتيريا: التجريبية والموجهة للسبب.
وصفة المضادات الحيوية التجريبيةبناءً على معرفة القابلية الطبيعية للبكتيريا ، والبيانات الوبائية حول مقاومة الكائنات الحية الدقيقة في المنطقة أو المستشفى ، وكذلك نتائج التجارب السريرية الخاضعة للرقابة. الميزة غير المشكوك فيها للوصفة التجريبية لأدوية العلاج الكيميائي هي إمكانية البدء السريع للعلاج. بالإضافة إلى ذلك ، هذا النهج يلغي تكلفة البحث الإضافي.
تعتمد الوصفة التجريبية للمضادات الحيوية على معرفة القابلية الطبيعية للبكتيريا ، والبيانات الوبائية حول مقاومة الكائنات الحية الدقيقة في المنطقة أو المستشفى ، ونتائج التجارب السريرية الخاضعة للرقابة.
ومع ذلك ، مع عدم فعالية العلاج المستمر بالمضادات الحيوية ، مع التهابات المستشفيات ، عندما يكون من الصعب افتراض العامل الممرض وحساسيته للمضادات الحيوية ، يتم البحث عن العلاج الموجه للسبب. وصفة مسبب للمضادات الحيويةلا يقتصر الأمر على عزل العامل المعدي عن المادة السريرية فحسب ، بل يشمل أيضًا تحديد حساسيته للمضادات الحيوية. لا يمكن الحصول على البيانات الصحيحة إلا من خلال التنفيذ الصحيح لجميع الروابط البحوث البكتريولوجية: من أخذ المادة السريرية ونقلها إلى معمل جرثومي وتحديد العامل الممرض لتحديد حساسيته للمضادات الحيوية وتفسير النتائج.
تستند وصفة المضادات الحيوية الموجه للسبب إلى عزل العامل المعدي عن بؤرة العدوى وتحديد حساسيته للمضادات الحيوية.
السبب الثاني للحاجة إلى تحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للأدوية المضادة للبكتيريا هو الحصول على بيانات وبائية عن بنية مقاومة مسببات الأمراض من العدوى المكتسبة من المجتمع والالتهابات المستشفيات. في الممارسة العملية ، يتم استخدام هذه البيانات في الوصفة التجريبية للمضادات الحيوية ، وكذلك لتشكيل تركيبات المستشفيات.
طرق تحديد الحساسية للمضادات الحيوية
طرق تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية مقسمة إلى مجموعتين: طرق الانتشار والتخفيف.
تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية:
طرق الانتشار
باستخدام أقراص المضادات الحيوية
بمساعدة الاختبارات الإلكترونية
طرق التربية
تربية في وسط مغذي سائل (مرق)
تربية في أجار
في اختبار حساسية انتشار القرص ، يتم تطبيق معلق بكتيري بكثافة محددة (عادةً ما يعادل معيار مكفارلاند للتعكر 0.5) على سطح أجار في طبق بتري ، ثم يتم وضع الأقراص التي تحتوي على كمية محددة من المضادات الحيوية. يؤدي انتشار المضاد الحيوي في الأجار إلى تكوين منطقة تثبيط لنمو الكائنات الحية الدقيقة حول الأقراص. بعد احتضان الكؤوس في منظم الحرارة عند درجة حرارة 35 - 37 درجة مئوية أثناء الليل ، تؤخذ النتيجة في الاعتبار عن طريق قياس قطر المنطقة المحيطة بالقرص بالمليمترات (الشكل 1).
الصورة 1.تحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة عن طريق طريقة انتشار القرص.
يتم إجراء تحديد حساسية الكائن الدقيق باستخدام اختبار E بشكل مشابه للاختبار بواسطة طريقة انتشار القرص. الفرق هو أنه بدلاً من قرص يحتوي على مضاد حيوي ، يتم استخدام شريط اختبار E يحتوي على تدرج لتركيزات المضادات الحيوية من الحد الأقصى إلى الحد الأدنى (الشكل 2). عند تقاطع منطقة تثبيط النمو الإهليلجي مع شريط الاختبار الإلكتروني ، يتم الحصول على الحد الأدنى من قيمة التركيز المثبط (MIC).
الشكل 2.تحديد حساسية الكائنات الدقيقة باستخدام الاختبارات الإلكترونية.
الميزة غير المشكوك فيها لطرق الانتشار هي سهولة الاختبار وتوافر الأداء في أي مختبر جرثومي. ومع ذلك ، نظرًا لارتفاع تكلفة الاختبارات الإلكترونية ، تُستخدم طريقة نشر القرص عادةً في الأعمال الروتينية.
طرق التربيةتعتمد على استخدام التخفيفات التسلسلية المزدوجة لتركيزات المضادات الحيوية من الحد الأقصى إلى الحد الأدنى (على سبيل المثال ، من 128 ميكروغرام / مل ، 64 ميكروغرام / مل ، إلخ إلى 0.5 ميكروغرام / مل ، 0.25 ميكروغرام / مل و 0.125 ميكروغرام / مل). في هذه الحالة ، يتم إدخال المضاد الحيوي بتركيزات مختلفة في وسط مغذي سائل (مرق) أو في أجار. بعد ذلك ، يتم وضع معلق بكتيري بكثافة محددة ، يتوافق مع معيار مكفارلاند للتعكر البالغ 0.5 ، في مرق المضادات الحيوية أو أعلى لوحة أجار. بعد الحضانة بين عشية وضحاها عند درجة حرارة 35 حوالي -37 حوالي درجة مئوية ، يتم تسجيل النتائج التي تم الحصول عليها. يشير وجود نمو الكائنات الحية الدقيقة في المرق (عكر المرق) أو على سطح الأجار إلى أن تركيز المضاد الحيوي هذا غير كافٍ لقمع صلاحيته. مع زيادة تركيز المضاد الحيوي ، يتدهور نمو الكائنات الحية الدقيقة. يعتبر أول أدنى تركيز للمضاد الحيوي (من سلسلة من التخفيفات المتسلسلة) ، حيث لا يتم تحديد نمو البكتيريا بصريًا ، على أنه الحد الأدنى للتركيز المثبط (MIC). يتم قياس MIC في ملغم / لتر أو ميكروغرام / مل (الشكل 3).
الحد الأدنى للتركيز المثبط (MIC) - أقل تركيز للمضاد الحيوي (ملجم / لتر أو ميكروغرام / مل) الذي يمنع نمو البكتيريا المرئي في المختبر تمامًا
الشكل 3تحديد قيمة IPC بالتخفيف في وسط مغذي سائل.
تفسير نتائج الحساسية
بناءً على البيانات الكمية التي تم الحصول عليها (قطر منطقة تثبيط نمو المضادات الحيوية أو قيمة MIC) ، يتم تقسيم الكائنات الحية الدقيقة إلى حساسة ومقاومة متوسطة ومقاومة (الشكل 4). للتمييز بين هذه الفئات الثلاث للحساسية (أو المقاومة) ، يسمى ب تركيزات الحدود(نقطة توقف) للمضاد الحيوي (أو القيم الحدية لقطر منطقة تثبيط نمو الكائنات الحية الدقيقة).
الشكل 4تفسير نتائج الحساسية البكتيرية وفقًا لقيم MIC.
تركيزات خط الحدود ليست قيمًا ثابتة. قد يتم تنقيحها ، اعتمادًا على التغيرات في حساسية سكان الكائنات الحية الدقيقة. يشارك الخبراء الرائدون (المعالجون الكيميائيون وعلماء الأحياء الدقيقة) الأعضاء في اللجان الخاصة في تطوير ومراجعة معايير التفسير. إحداها هي اللجنة الوطنية الأمريكية لمعايير المختبرات الإكلينيكية (NCCLS). حاليًا ، يتم التعرف على معايير NCCLS في العالم وتستخدم كمعايير دولية لتقييم نتائج تحديد حساسية البكتيريا في الدراسات الميكروبيولوجية والسريرية متعددة المراكز.
هناك طريقتان لتفسير نتائج الحساسية: ميكروبيولوجية وسريرية. يعتمد التفسير الميكروبيولوجي على تحليل توزيع قيم تركيز المضادات الحيوية التي تمنع بقاء البكتيريا. يعتمد التفسير السريري على تقييم فعالية العلاج بالمضادات الحيوية.
الكائنات الدقيقة الحساسة (حساسة)
تعتبر البكتيريا حساسة سريريًا (مع الأخذ في الاعتبار المعلمات المختبرية) إذا تم علاج الالتهابات التي تسببها هذه الكائنات الدقيقة بجرعات قياسية من المضادات الحيوية ولوحظ تأثير علاجي جيد.
في حالة عدم وجود معلومات سريرية موثوقة ، يعتمد التقسيم الفرعي إلى فئات الحساسية على المحاسبة المشتركة للبيانات المختبرية والحركية الدوائية ، أي على تركيزات المضادات الحيوية التي يمكن تحقيقها في موقع الإصابة (أو في مصل الدم).
الكائنات الحية الدقيقة المقاومة (المقاومة)
تُصنف البكتيريا على أنها مقاومة (مقاومة) عندما لا يكون هناك تأثير للعلاج في علاج العدوى التي تسببها هذه الكائنات الدقيقة حتى عند استخدام الجرعات القصوى من المضادات الحيوية. هذه الكائنات الحية الدقيقة لها آليات المقاومة.
الكائنات الحية الدقيقة ذات المقاومة المتوسطة (وسيطة)
مقاومة الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية
سريريًا ، تُشير المقاومة الوسيطة للبكتيريا إلى أن العدوى التي تسببها هذه السلالات يمكن أن يكون لها نتائج علاجية مختلفة. ومع ذلك ، قد يكون العلاج ناجحًا إذا تم استخدام المضاد الحيوي بجرعة أعلى من المعيار ، أو إذا كانت العدوى موجودة في مكان يتراكم فيه الدواء المضاد للبكتيريا بتركيزات عالية.
من وجهة نظر ميكروبيولوجية ، تشتمل البكتيريا ذات المقاومة المتوسطة على مجموعة سكانية فرعية تتوافق مع قيم MIC أو قطر المنطقة ، بين الكائنات الحية الدقيقة الحساسة والمقاومة. في بعض الأحيان يتم دمج السلالات ذات المقاومة المتوسطة والبكتيريا المقاومة في فئة واحدة من الكائنات الحية الدقيقة المقاومة.
وتجدر الإشارة إلى أن التفسير السريري لحساسية البكتيريا للمضادات الحيوية مشروط ، لأن نتيجة العلاج لا تعتمد دائمًا فقط على نشاط الدواء المضاد للبكتيريا ضد العامل الممرض. الأطباء على دراية بالحالات التي تم فيها الحصول على تأثير سريري جيد مع مقاومة الكائنات الحية الدقيقة ، وفقًا للدراسات في المختبر. على العكس من ذلك ، مع حساسية العامل الممرض ، قد يكون العلاج غير فعال.
في بعض الحالات السريرية التي يكون فيها اختبار الحساسية بالطرق التقليدية غير كافٍ ، يتم تحديد الحد الأدنى لتركيز مبيد الجراثيم.
الحد الأدنى لتركيز مبيد الجراثيم (MBC)- أقل تركيز لمضاد حيوي (ملجم / لتر أو ميكروغرام / مل) ، والذي عند دراسته في المختبر ، يتسبب في موت 99.9٪ من الكائنات الحية الدقيقة من المستوى الأولي خلال فترة زمنية معينة.
الحد الأدنى لتركيز مبيد الجراثيم (MBC) هو أقل تركيز لمضاد حيوي (ملغم / لتر أو ميكروغرام / مل) والذي ، في دراسة مخبرية ، يتسبب في وفاة 99.9٪ من الكائنات الحية الدقيقة من المستوى الأولي خلال فترة زمنية معينة.
يتم استخدام قيمة MBC في العلاج بالمضادات الحيوية التي لها تأثير جراثيم ، أو في حالة عدم وجود تأثير العلاج بالمضادات الحيوية في فئة خاصة من المرضى. قد تكون الحالات الخاصة لتحديد MCD ، على سبيل المثال ، التهاب الشغاف الجرثومي ، والتهاب العظم والنقي ، أو العدوى المعممة في المرضى الذين يعانون من حالات نقص المناعة.
في الختام ، أود أن أشير إلى أنه لا توجد اليوم طرق تسمح بيقين مطلق للتنبؤ بالتأثير الإكلينيكي للمضادات الحيوية في علاج الأمراض المعدية. ومع ذلك ، يمكن أن تكون بيانات الحساسية بمثابة دليل جيد للأطباء لاختيار وتعديل العلاج بالمضادات الحيوية.
مضادات حيوية
المضادات الحيوية - مواد العلاج الكيميائي بيول. (جرثومي ، نباتي ، حيواني) ، أصل شبه اصطناعي أو اصطناعي ، يتسبب الجاودار بتركيزات صغيرة في تثبيط تكاثر أو موت الميكروبات والخلايا السرطانية الحساسة لها في البيئة الداخلية (داخليًا) للكائن الحي. من بين A. هناك مواد من هياكل لا حلقية ، حلقية غير متجانسة ، عطرية ، تتراسيكلين ، بالإضافة إلى الماكروليدات ، كينولون ، أمينوغليكوزيدات ، ب لاكتام ، بولي ببتيدات ، إلخ. يمكن أن يكون لها تأثير ضيق (على سبيل المثال ، بنزيل بنسلين) أو معتدل (مثل الأمبيسلين) أو واسع (على سبيل المثال ، أمينوغليكوزيدات ، تتراسيكلين). ترتبط الحساسية الطبيعية للميكروبات لـ A. مع وجود في تكوينها للأهداف ، والتركيبات ، التي يكون لـ A. في الميكروب ، قلة توافر مثل هذه الأهداف لتقارب ضعيف من A. أو A. غالبًا ما تكون أهداف A. هي جدار الخلية ، خاصةً الببتيدوغليكان والغشاء السيتوبلازمي ، وعادة ما تكون بيرميز أو غيرها من الإنزيمات الموجودة فيه ، أو الريبوسومات ، أو الميتوكوندريا ، أو الهياكل الوراثية ، أو المراحل الفردية للبروتين ، NK ، وتخليق الدهون. اعتمادًا على أهمية الأهداف للوظائف الحيوية للكائن الحي ، وقابلية عكس الضرر ، وكذلك على التركيز وظروف العمل ، فإن المضادات الحيوية لها تأثير مبيد للجراثيم ينتهي بموت الكائن ، أو تأثير ميكروبوستاتيك.
في الحالة الأخيرة ، يتم تعليق نمو وتكاثر الميكروب في وجود A. تغيير أهداف العمل ويؤدي إلى تطوير مقاومة الميكروبات لـ And. ، ويمكن أن تمتد الحواف أيضًا إلى الآخرين ، وبآلية عمل مماثلة. من الممكن أيضًا وجود آليات أخرى للمقاومة المكتسبة لـ A. كحد من وصول A. الميكروب في المقاومة المظهرية ، تزداد مقاومة A في معظم الأفراد من السكان ، المقاومة تكيفية ، مؤقتة بطبيعتها وتسببها ظاهرة قمع - تثبيط جينات الكروموسوم أو البلازميدات. - أو طفرة متعددة الخطوات في الكروموسوم أو البلازميدات R ، وكذلك عن طريق نقل R-plasmid أو منطقة الكروموسوم المسؤولة عن المقاومة ، عن طريق الاقتران أو التنبيغ أو التحول من فرد مقاوم إلى قابل للإصابة ، ونقل جينات المقاومة بواسطة الينقولات . يؤدي تحور ونقل المادة الوراثية ، كقاعدة عامة ، إلى تطوير مقاومة لواحد أو اثنين من A. مُسَمًّى. سلالات متعددة المقاومة. في مجموعة سكانية حساسة لـ A. في البداية ، توجد طفرات مقاومة فردية أو مواد مؤتلفة. في الموائل غير الانتقائية ، عادة ما يتم التخلص منها ، وفي مكان انتقائي ، أي في البيئة التي تحتوي على A. المقابلة ، يكتسبون بسرعة مركزًا مهيمنًا. قد يكون ظهور مجموعات من الميكروبات المقاومة لـ A. قد يكون أيضًا بسبب دخول السكان واختيار مهاجرين مقاومين من مجموعات سكانية أخرى. غالبًا ما تُلاحظ هذه الظاهرة في المستشفيات.
يمكن أن يكون للتأثير المشترك لاثنين أو ثلاثة أ ، اعتمادًا على آليات عملهم ، إجمالي (مضاف) ، أقل من الإجمالي (المضاد) ، أو أعلى من التأثير الكلي (التآزري). لا يتطابق A. دائمًا عند اختباره في تجارب أنبوب الاختبار وفي علاج b-nogo ، والذي يحدث بسبب تنشيطه أو تعطيله نتيجة للتفاعلات الأيضية للكائن الكلي ، والظروف غير الملائمة ، التي يحدث فيها عمل A. يتجلى ، وعدم تجانس المجموعات الميكروبية على أساس المقاومة لـ A. الاستجابة ، انتقال المرض إلى شكل مزمن ، عدوى المخدرات. يشار إلى احتمالية حدوث تأثيرات ماسخة ومسببة للأورام لبعض أ. يمكن تحقيق تأثير علاجي دون تطور المضاعفات إذا تم مراعاة المبادئ العلمية للعلاج الكيميائي العقلاني.
الأجهزة المستهدفة
شديد التأثر بالمضادات الحيوية للجهاز الهضمي. إنه يمرر تمامًا تركيبة الدواء من خلال نفسه ، مما يؤدي دائمًا إلى تهيجها وتعطيل البكتيريا الطبيعية. الغثيان والغثيان والقيء والإسهال أو الإمساك - وهذا هو رد فعل الجهاز الهضمي للدواء. وسيستمر هذا حتى يتوقف الدواء وتعود البكتيريا إلى طبيعتها. يصعب تحمل المضادات الحيوية التي يتم تناولها على معدة فارغة بشكل خاص - فهي تذهب مباشرة إلى المعدة والأمعاء ، مما يسبب تهيجًا.
مصدر إزعاج آخر يحدث عند تناول المضادات الحيوية هو الحساسية. بشكل عام ، تعتبر هذه عملية طبيعية في جسم الإنسان ، لأنه ببساطة من المستحيل إدراك المضاد الحيوي بشكل طبيعي. تسمى هذه الحساسية طبية ويمكن أن تكون ذات شدة مختلفة تمامًا - من الطفح الجلدي البسيط إلى القروح المفتوحة أو وذمة كوينك بسبب صدمة الحساسية.
تناول المضادات الحيوية أمر خطير اعضاء داخلية. الحقيقة هي أن المضاد الحيوي نفسه له تأثير سام. عندما يتراكم في الجسم ، فإنه يمر عبر الكبد والكلى والطحال ويسمم كل من مسببات الأمراض وخلايا الأعضاء. قد يكون للمضاد الحيوي تأثير سام للدم على الكبد ، خاصة إذا كان كبد المريض غير صحي وقت بدء العلاج. نفس الشيء مع الكلى. يمكن أن يؤدي المضاد الحيوي إلى تأثير سام على الكلى ، مما يضر بصحة الإنسان بشكل عام.
يعتبر التسمم العصبي من الآثار الجانبية الأخرى التي تسببها المضادات الحيوية. يمكن أن يتطور الصمم والعمى وحتى ضعف الجهاز الدهليزي مع استخدام التتراسيكلين للعلاج أو عقاقير عائلة الأمينوغليكوزيد. إذا لم تظهر السمية العصبية عند مستوى حرج ، فقد تقتصر على دوخة طفيفة وثقل في الرأس. لكن أكثر قوة أثر جانبي- هي آفة تصيب الأعصاب السمعية والعينية والوجهية ، والتي قد لا تتعافى بعد انتهاء الدواء أو انسحابه.
الأدب
1. NCCLS. معايير الأداء لاختبار الحساسية للمضادات الميكروبات؛ الملحق المعلوماتي التاسع M100-S9.- 1999.- V.19.- N.1.
2. طرق تحديد قابلية البكتيريا للعوامل المضادة للميكروبات. وثيقة نهائية من EUCAST // Clin Microbiol Infect. - 1998.- V.4.- ص 291-296.
استضافت على Allbest.ru
...وثائق مماثلة
دراسة مواد العلاج الكيميائي مجتمعة في مجموعة من المضادات الحيوية. تشكل عمل الأدوية أثناء التخليق الحيوي للكائنات الحية الدقيقة. دراسة إستراتيجية العلاج بالمضادات الحيوية وطرق التغلب على مقاومة الكائنات الدقيقة للمضادات الحيوية.
عرض تقديمي ، تمت الإضافة في 06/08/2017
العلاج الكيميائي المضاد للميكروبات. مجموعات وفئات مضادات الميكروبات الأدوية. العلاج التجريبي. الاستخدام الوقائي للمضادات الحيوية. خوارزمية وصف المضادات الحيوية. اختبار الحساسية للمضادات الحيوية.
عرض ، تمت إضافة 11/23/2015
رواد المضادات الحيوية. توزيع المضادات الحيوية في الطبيعة. دور المضادات الحيوية في التكاثر الميكروبي الطبيعي. عمل المضادات الحيوية للجراثيم. المقاومة البكتيرية للمضادات الحيوية. الخصائص الفيزيائيةالمضادات الحيوية ، تصنيفها.
العرض التقديمي ، تمت إضافة 03/18/2012
تصنيف المضادات الحيوية حسب آلية عملها على جدار الخلية. دراسة مثبطات وظائف الغشاء السيتوبلازمي. النظر في الطيف المضاد للميكروبات من التتراسيكلين. الاتجاهات في تطوير مقاومة الكائنات الحية الدقيقة في الوقت الحاضر في العالم.
الملخص ، تمت الإضافة في 02/08/2012
تاريخ اكتشاف المضادات الحيوية. آلية عمل المضادات الحيوية. العمل الانتقائي للمضادات الحيوية. مقاومة المضادات الحيوية. المجموعات الرئيسية للمضادات الحيوية المعروفة اليوم. ردود الفعل السلبية الرئيسية للمضادات الحيوية.
التقرير ، تمت إضافة 03.11.2009
مفهوم الحساسية على أنها قدرة الجسم على إدراك التهيج من البيئة الخارجية والداخلية. خصائص الاستقبال ووظائف أجهزة التحليل. الأنواع الرئيسية للمستقبلات. التصنيف السريري للحساسية ، ملامح أنواعها المعقدة.
عرض تقديمي ، تمت إضافة 2015/04/26
الاختبار ، تمت إضافة 10/30/2009
تاريخ اكتشاف البنسلين. تصنيف المضادات الحيوية وخصائصها الدوائية والعلاج الكيميائي. العملية التكنولوجيةتلقي المضادات الحيوية. المقاومة البكتيرية للمضادات الحيوية. آلية عمل الكلورامفينيكول ، الماكروليدات ، التتراسيكلين.
الملخص ، تمت الإضافة بتاريخ 04/24/2013
مصادر الحصول على المضادات الحيوية ، وتصنيفها حسب اتجاه وآلية العمل الدوائي. أسباب مقاومة المضادات الحيوية ، مبادئ العلاج المنطقي بالمضادات الحيوية. خصائص مبيد للجراثيم من البنسلين ، آثاره الجانبية.
العرض التقديمي ، تمت إضافة 11/16/2011
المركبات الكيميائية ذات الأصل البيولوجي التي لها تأثير ضار أو مدمر على الكائنات الحية الدقيقة بتركيزات منخفضة جدًا وفقًا لمبدأ المضادات الحيوية. مصادر المضادات الحيوية واتجاه عملها الدوائي.
مع التغيرات المرضية ، يسمح لك الفحص البصري للقصبة الهوائية والشعب الهوائية بتحديد وتقييم:
1. التغيرات الالتهابية في الغشاء المخاطي.
2. وجود ما يسمى بخلل الحركة الرغامي القصبي للجزء الغشائي من الغشاء المخاطي للقصبة الهوائية والشعب الهوائية الكبيرة ؛
3. الأورام الحميدة والخبيثة.
4. درجات مختلفة من تضيق الشعب الهوائية.
5. أجسام غريبة من القصبة الهوائية والشعب الهوائية الكبيرة (رئيسية ، قطعية ، أقل في كثير من الأحيان تحت القصبة) ؛
6. مصدر النزيف الرئوي.
التغيرات الالتهابية في الغشاء المخاطي. تشمل العلامات التنظيرية للتغيرات الالتهابية في الغشاء المخاطي للقصبة الهوائية والشعب الهوائية (الشكل 2.42) ما يلي: 1) احتقان في الغشاء المخاطي. 2) تورمها. 3) تراكمات منفصلة من إفرازات مخاطية أو مخاطية (مع التهاب باطن القصبات النزلي) أو محتويات قيحية وفيرة في تجويف القصبات (على سبيل المثال ، مع التهاب باطن القصبات القيحي). العلامة الأخيرة لها قيمة تشخيصية مستقلة ومهمة للغاية ، لأنها تشير إلى عملية قيحية في الرئة ، على الرغم من أنها قد لا تكون دائمًا بسبب التهاب الشعب الهوائية القيحي (يمكن أن يدخل القيح تجويف الشعب الهوائية من الأنسجة السنخية ، والخراج ، وما إلى ذلك). تتطلب صورة التنظير الداخلي هذه دائمًا مزيدًا من الفحص المتعمق للمرضى.
خلل الحركة الرغامي القصبيتعتبر العلامة التنظيرية الرئيسية لخلل الحركة الرغامي القصبي زيادة كبيرة مقارنة بمعيار اتساع حركات الجهاز التنفسي للجزء الغشائي من جدار القصبة الهوائية والشعب الهوائية الرئيسية ، وبالتالي درجة تضيق الزفير.
مع خلل الحركة من الدرجة الأولى ، هناك تضيق الزفير في القصبة الهوائية والشعب الهوائية الرئيسية تصل إلى 2/3 من التجويف مع الحفاظ على تكوينها الطبيعي (المستدير) أو بعض تسطيح التجويف (الشكل 2.43).
تتميز درجة خلل الحركة II بالإغلاق الكامل أثناء الزفير للأجزاء الخلفية والأمامية من جدار الغشاء وتسطيح كبير في تجويف القصبة الهوائية والشعب الهوائية.
يمكن أن يتطور خلل الحركة الرغامي القصبي في أمراض الرئة المختلفة ، مما يزيد بشكل كبير من مقاومة القصبة الهوائية والشعب الهوائية الرئيسية أثناء الزفير القسري ويؤدي إلى تفاقم انسداد مجرى الهواء الزفير. يجب أن نتذكر أن الطريقة الوحيدة الموثوقة والميسورة التكلفة للكشف عن خلل الحركة الرغامي القصبي هي تنظير القصبات.
الأورام. تتنوع الصورة بالمنظار في الأورام الحميدة والخبيثة في الرئتين وتعتمد ، أولاً وقبل كل شيء ، على طبيعة نمو الورم. مع نمو داخل القصبة في تجويف القصبات ، في معظم الحالات ، يكون نمو أنسجة الورم بسطح وعرة من اللون الوردي أو الرمادي أو الأحمر الأرجواني مرئيًا بوضوح (الشكل 2.44). مع نمو الورم حول القصبات على الغشاء المخاطي في الشعب الهوائية ، كقاعدة عامة ، يمكن فقط اكتشاف علامات غير مباشرة للأورام: سماكة محلية كبيرة للغشاء المخاطي ، وتسلل جدار الشعب الهوائية ، وسطح غير متساوٍ وسهل النزيف.
العلامات التنظيرية الموصوفة للورم ، خاصة مع نموه حول القصبة الهوائية ، والتي تم الكشف عنها بالفحص البصري لشجرة القصبة الهوائية ، غير محددة وتتطلب تشخيصًا تفاضليًا لأمراض الرئة الأخرى. لذلك ، في جميع الحالات التي يكون فيها أثناء تنظير القصبات أدنى شك في الطبيعة الورمية للتغيرات المرضية في الشعب الهوائية ، يلزم أخذ خزعة من الأنسجة ، يليها فحص نسيجي للمادة التي تم الحصول عليها.
يجب التأكيد على أنه مع التوطين المحيطي للأورام الواقعة بعيدًا عن القصبات الهوائية الفرعية ، فإن الفحص البصري لشجرة القصبة الهوائية أثناء تنظير القصبات غير مفيد. في هذه الحالات ، من الضروري استخدام طرق أخرى للحصول على المواد من الأجزاء البعيدة من الرئتين للفحص النسيجي والخلوي ، على سبيل المثال ، غسل القصبات الهوائية أو سائل غسل القصبات الهوائية (BAL). ومع ذلك ، من أجل أن تكون طرق الحصول على المواد أثناء تنظير القصبات أكثر فعالية ، يجب أن يكون أخصائي التنظير الداخلي موجهًا جيدًا في الصورة السريرية والإشعاعية للمرض والتوطين المقترح وطبيعة العملية المرضية في الرئتين. يوضح هذا دور المناقشة الأولية المفصلة المشتركة للبروتوكول الأمثل لفحص تنظير القصبات من قبل ثلاثة أطراف معنية: الطبيب المعالج وأخصائي الأشعة وأخصائي التنظير الداخلي. مثل هذه المناقشة مهمة بشكل خاص إذا كان المريض يشتبه في إصابته بورم خبيث في الرئة.
تضيق الشعب الهوائية. يكشف تنظير القصبات عن درجات مختلفة من تضيق الشعب الهوائية. بالنسبة للدرجة الأولى من التضيق ، فإن تضيق تجويف القصبة الهوائية بنسبة 1/3 هو سمة مميزة للدرجة الثانية - حتى 2/3 ، للدرجة الثالثة - أكثر من 2/3. غالبًا ما يحدث تضيق الشعب الهوائية بسبب:
1. نمو الورم داخل القصبة وحتى حول القصبات.
2. السل القصبي النشط.
3. cicatricial التغييرات.
4. الضغط الخارجي (الانضغاطي) للقصبات الهوائية عن طريق تضخم الغدد الليمفاوية شبه القصبية أو المنصفية مع ورم الحبيبات اللمفاوية ، التهاب القصبات الهوائية السلي ، الساركويد أو تمدد الأوعية الدموية في الشريان الأورطي ، إلخ.
الأجسام الغريبة للقصبات الهوائية. يكشف تنظير القصبات أيضًا عن أجسام غريبة في القصبة الهوائية والشعب الهوائية الكبيرة (رئيسية ، قطاعية ، أقل في كثير من الأحيان). مع وجود أخصائي تنظير داخلي مؤهل تأهيلا عاليا ، فإن هذه المهمة عادة ليست صعبة للغاية. ومع ذلك ، يجب أن نتذكر أن التشخيص التنظيري للأجسام الغريبة التي تم استنشاقها منذ أكثر من شهر إلى شهرين معقد بسبب حقيقة أن عملية التهابية قيحية تتطور بسرعة في موقعها ، وغالبًا ما يغطي نمو الأنسجة الحبيبية والسرية القيحية الجسم الغريب . في هذه الحالات ، من الضروري الاستنشاق الدقيق للإفراز القيحي والنظر في البيانات السريرية والتشخيصية.
في بعض الحالات ، يمكن الكشف عن حصوات كلسية (التهاب القصيبات) في تجويف الفص الفصي أو القصبات الهوائية القطعية أثناء تنظير القصبات. وغالبًا ما تكون عبارة عن صخور كلسية اخترقت تجويف القصبات عن طريق اختراق الغدد الليمفاوية الرغامية القصبية المصابة بالسل. يؤدي ظهور التهاب القصيبات في تجويف القصبات الهوائية إلى ظهور تفاعل التهابي عنيف ثم حدوث تغيرات ندبية ، مما يؤدي إلى تضيق (تضيق) تجويف القصبات الهوائية.
نزيف رئوي. يمكن استخدام تنظير القصبات لتحديد مصدر النزيف الرئوي. كما تعلم ، فإن الأسباب الأكثر شيوعًا لهذه المضاعفات هي تسوس سرطان الرئة والسل وتوسع القصبات. باستخدام تنظير القصبات ، يتم تحديد شدة النزيف الرئوي تقريبًا أولاً. مع فقدان الدم الصغير (أقل من 50 مل في اليوم) ، عادة ما توجد طبقات دموية صغيرة أو شوائب دموية في محتويات الغشاء المخاطي في القصبات على جدار القصبات (الشكل 2.45 ، أ). مع نزيف رئوي معتدل (يصل إلى 200 مل في اليوم) ، يملأ الدم القصبات الهوائية أو القصبات الهوائية القطعية (الشكل 2.45 ، ب) ، ومع نزيف حاد (أكثر من 300 مل في اليوم) ، اثنين أو أكثر من القصبات الهوائية (2.45 ، ج) ).
نظرًا لأن مصدر النزيف الرئوي غالبًا ما يكون بعيدًا عن الفروع الفرعية للقصبات الهوائية ، فإن تنظير القصبات يتطلب فحصًا شاملاً لجميع فروع القصبات الهوائية القطعية من أجل تحديد تدفق الدم المحتمل من أحدها. يتيح التحليل الأولي للبيانات الإشعاعية (على سبيل المثال ، علامات الغموض القطعي أو الفصي للرئة) تحسين البحث بالمنظار عن مصدر النزيف أثناء تنظير القصبات.
تعتمد طريقة الانتشار على قدرة المضادات الحيوية على الانتشار في سمك الآجار وتسبب تأخير أو تثبيط أو كبت نمو ميكروب الاختبار. يعتمد معدل انتشار محاليل المضادات الحيوية في أجار على الطبيعة الكيميائية للمستحضر وتكوين الوسط ودرجة الحموضة الخاصة به. من الأهمية بمكان أن الرقم الهيدروجيني للعازل الذي يتم فيه تحضير محاليل عمل المضادات الحيوية. في هذا الصدد ، عند تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية عن طريق الانتشار في أجار ، يجب اتباع القواعد التالية لإجراء التجارب.
1. يجب إجراء الاختبار على وسائط ذات تركيبة معينة ، حيث يختلف انتشار المضاد الحيوي اعتمادًا على تكوين أجار المغذيات. درجة الحموضة في الوسط لها أهمية كبيرة. وهكذا ، بالنسبة للمضادات الحيوية مثل الستربتومايسين والستربتوثريسين ، تزداد منطقة التثبيط للاختبار الميكروبي مع زيادة الرقم الهيدروجيني للركيزة ، وينخفض للأوريوميسين والتيراميسين ، ولا يتغير بالنسبة للكلوروميسيتين.
2. يجب أن تكون كثافة تلقيح كائن الاختبار ثابتة لكل سلسلة من التجارب.
3. يجب أن تكون مدة ملامسة المضاد الحيوي للوسط قبل تلقيح كائن الاختبار ثابتة ، لأن منطقة التثبيط تعتمد على وقت ملامسة المضاد الحيوي مع الأجار وقيمته ليست هي نفسها بالنسبة للمضادات الحيوية المختلفة. ثبت أيضًا أنه بين لحظة زرع كائن الاختبار ولحظة إنباته ، تمر فترة زمنية معينة ، يستمر خلالها المضاد الحيوي في الانتشار في الأجار.
للحصول على بيانات كمية أكثر دقة حول حساسية الميكروبات للمضادات الحيوية باستخدام طريقة الانتشار ، يوصى بنشر الأدوية مسبقًا في أجار لمدة 20-24 ساعة.
4. يجب ألا تكون تركيزات الأشخاص المختبرين والمحاليل القياسية للمضادات الحيوية عالية. فقط لتركيزات منخفضة من المضاد الحيوي ، قطر مناطق تثبيط النمو يتناسب مع تركيز المضاد الحيوي. عند تركيزات أعلى من حد معين ، فإن أقطار المنطقة هي نفسها. على سبيل المثال ، المناطق هي نفسها بالنسبة لمحاليل 5 و 10٪ من النيوميسين ، ومحاليل 10 و 20٪ من الستربتومايسين ، إلخ.
5. يجب أن يكون لأطباق بتري المستخدمة في التجارب قاع مسطح ونفس القطر ، لأن سمك طبقة الأجار يؤثر على انتشار المضاد الحيوي.
في الوقت الحاضر ، تم تطوير طرق مختلفة لاختبار المضادات الحيوية عن طريق انتشار الأجار ويتم استخدامها. وتشمل هذه: طرق الثقوب ، الأخاديد ، الأسطوانات ، الكتل ، الأقراص ، الأجهزة اللوحية ، إلخ.
طريقة قرص الورق.تم اقتراح طريقة أقراص الترشيح الورقية لتقدير نشاط المواد المضادة الحيوية من قبل Lou و Skell و Thornbury في عام 1945. وهي تتكون من حقيقة أن أقراص ورق الترشيح المعقمة توضع على سطح صفيحة أجار مُصنَّفة بكائن اختبار. يتم ترطيب الأقراص بكمية محددة الجرعات من محلول المضادات الحيوية ، أو أقراص مشربة بالمضادات الحيوية متوفرة من صناعتنا.
صب 20 مل من أجار المغذيات المنصهرة في أطباق بتري المعقمة بقطر 10 سم. للحصول على عشب بكتيري موحد ، يتم سكب 1 مل من المليار من تعليق ثقافة الاختبار على سطح أجار في طبق. يتم توزيع السائل بالتساوي على سطح الكوب. يُمتص السائل الزائد بواسطة ماصة Pasteur ويُجفف الأجار في منظم حرارة أو على سطح المكتب مع إغلاق الكوب.
على سطح الأجار الملقح على مسافة 2 سم من حافة الطبق وما فوق. على مسافة متساوية من بعضها البعض ، توضع الأقراص الورقية التي تحتوي على المضادات الحيوية بملاقط واحدة تلو الأخرى. في الجزء السفلي من الكوب ، قاموا بتسجيل اسم المضاد الحيوي الذي تم تشريب القرص به. تحفظ الأكواب في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة ، وبعد ذلك توضع في منظم الحرارة لمدة 16-18 ساعة. لأخذ النتائج في الاعتبار ، يتم تحديد قطر منطقة تثبيط نمو الميكروبات حول الأقراص باستخدام مسطرة مليمترية أو بوصلات أو ورق رسم بياني أو عداد خاص.
يشير غياب تثبيط النمو الميكروبي إلى مقاومة الميكروب قيد الدراسة لهذا المضاد الحيوي. المناطق ، التي لا يتجاوز قطرها 15 مم ، تشير إلى حساسية ضعيفة للمضاد الحيوي. تم العثور على المناطق من 15 إلى 25 ملم في الميكروبات الحساسة. تتميز الميكروبات شديدة الحساسية بمناطق يزيد قطرها عن 25 مم.
طريقة الاسطوانة.تستخدم هذه الطريقة أسطوانات من الألومنيوم يبلغ قطرها حوالي 5 مم ، بطول حوالي 10 مم ، أو زجاج مقطوع من أنبوب وملحم على اللهب في كلا الطرفين. يتم وضع اسطوانات مطبوخة بالستينسيل على السطح المجمد لآجار المصنف في أطباق بتري مع الميكروبات المدروسة. ثم يتم سكب العديد من المضادات الحيوية أو التخفيفات من أحد المضادات الحيوية. بعد الحضانة في منظم الحرارة ، يتم تحديد أقطار مناطق نقص نمو كائن الاختبار.
يمكن أيضًا استخدام طريقة الأسطوانة في التعديل التالي: أولاً ، يتم سكب 20 مل من أجار في طبق بتري. بعد أن يبرد الأجار ، يتم سكب 5 مل أخرى من الأجار يحتوي على جراثيم أو خلايا نباتية من ميكروب الاختبار على سطحه ، ويتم توزيعه بالتساوي على كامل سطح الطبقة الأولى عن طريق التأرجح اللطيف. بعد ساعة ، توضع أسطوانية معقمة على سطح الأجار المجمد على استنسل ، ثم تضاف إليها جرعة دقيقة من المضادات الحيوية.
طريقة الأخدود.يُسكب أجار في أطباق بتري المعقمة ويُترك ليتجمد. يتم قطع شريط بعرض 1 سم من الأجار المجمد بطول قطر الكأس ، ويتم سكب أجار ذائب يحتوي على نسبة معينة من الدواء في الأخدود المتشكل. عندما يتصلب الأجار الموجود في الأخدود ، توضع أطباق بتري في منظم حرارة لمدة 3-4 ساعات حتى ينتشر الدواء من الأخدود إلى البيئة.
تزرع ثقافة البكتيريا على سطح الآجار بضربات عمودية على الأخدود وعبور الطبق بأكمله من الحافة إلى الحافة (بما في ذلك الأخاديد). ثم توضع أطباق بتري في منظم الحرارة لتنمية البكتيريا عند درجة الحرارة المثلى لمدة 20-24 ساعة.
تؤخذ النتائج في الاعتبار من خلال كثافة النمو. تنمو السلالات المقاومة على طول الطريق حتى الأخدود وحتى فوق سطحه. يتأخر نمو الثقافات الحساسة للأدوية أو يتوقف عند مسافات مختلفة من الأخدود ، اعتمادًا على درجة الحساسية. يمكن قياس هذه المسافة بمسطرة ملليمتر.
طريقة الثقب.يتم تلقيح أجار في طبق بتري بميكروب الاختبار. بمساعدة المثقاب المكلس للسدادات ، يتم قطع العديد من الثقوب في أجار ، حيث يتم سكب قطرة أو قطرتين من الأجار المنصهر وتبريده إلى 45 درجة مئوية لتشكيل القاع. ثم يتم وضع تخفيفات مختلفة من المضاد الحيوي في التجاويف الناتجة. توضع الأكواب في منظم الحرارة لمدة 20-24 ساعة. يتم تحديد درجة حساسية ميكروب الاختبار للمضاد الحيوي من خلال عرض منطقة تثبيط النمو ، معبراً عنها بالمليمترات ، أو بتركيز المادة في التخفيف الأخير ، والذي لا يزال قادرًا على تثبيط نمو الميكروبات تحت يذاكر.
طريقة كتلة أجار.تستخدم هذه الطريقة ، التي اقترحها إيجوروف (1957) ، بشكل أساسي لدراسة العلاقات العدائية بين الميكروبات وتتكون مما يلي. يُسكب 20-25 مل من أجار المغذيات المنصهر المناسب لزراعة المضاد في طبق بتري. عندما يصلب الأجار ، يتم قطع الكتل منه بمثقاب فلين معقم (20-22 مم) ، يتم نقله بمشرط معقم إلى وسط الأطباق الأخرى ، واحد لكل طبق. بعد ذلك ، تُسكب الأكواب ذات الكتل بوسط غذائي مثالي لنمو ميكروبات الاختبار ، بحيث ترتفع الكتلة فوق مستوى الوسط بمقدار 1 - 1.5 ملم. بمجرد أن يتم ضبط الأجار ، يجب تجفيف الألواح لإزالة أي ماء متكثف. ثم يتم زرع سطح كتلة أجار بثقافة المضاد. بعد يومين أو ثلاثة أيام أو أكثر من الحضانة ، يتم وضع خطوط على كائنات الاختبار على طول أنصاف أقطار لوحة أجار في الطبق. بعد فترة حضانة مناسبة لمدة 18-20 ساعة ، يتم فحص اللوحات.
لتحديد نشاط المضاد الحيوي للفطريات الشعاعية ، يوصى باستخدام طريقة معدلة نوعًا ما من كتل الآجار ، والتي تتمثل في حقيقة أن الشعاعية تزرع فورًا في "عشب" مستمر على سطح وسط مناسب لتنميته وتشكيل مادة مضاد حيوي. بعد ذلك ، يتم قطع كتل الآجار من الوسط الذي تطورت عليه الفطريات الشعاعية جيدًا ونقلها إلى أطباق بتري المعقمة ، وبعد ذلك يتم سكبها في وسط أجار مبرد إلى 65-75 درجة مئوية ، وهو أمر مناسب لنمو ميكروبات الاختبار . عندما يصلب الأجار ، توضع الأكواب في منظم حرارة ليوم واحد بحيث يكون لمواد المضادات الحيوية التي تكونت بواسطة الفطريات الشعاعية الوقت لتنتشر في البيئة ، ثم يتم تلقيح ميكروبات الاختبار بضربات قطرية.
طريقة الكمبيوتر اللوحي.اقترح وايتهاوس (1961) طريقة لتحديد الخصائص المضادة للبكتيريا للمضادات الحيوية وأدوية العلاج الكيميائي الأخرى باستخدام أقراص تتكون من 90٪ أكاسيد لواحد أو أكثر من المعادن: التيتانيوم ، الزركونيوم ، الهافنيوم ، الثوريوم أو السيريوم و 10٪ السليلوز. للربط ، يتم تقديم القليل من أجار أجار. في الأجهزة اللوحية أثناء تصنيعها ، يضاف مضاد حيوي أو عامل علاج كيميائي. لتحديد نشاطها ، توضع الأقراص على العشب مع بكتيريا الاختبار.
استخدم Bene et al. (1962) طريقة ضغط المستحضرات في أقراص لتحديد النشاط المضاد للبكتيريا للمواد ضعيفة الذوبان. يتم ضغط هذه المواد بالتلك بنسب مختلفة. يتم وضع الأقراص التي تم الحصول عليها على سطح أجار المصنف ببكتيريا الاختبار. بعد الحضانة ، تظهر مناطق معقمة وصغيرة الحجم في موقع تطبيق الأقراص ، تختلف في محتوى المادة الموجودة في الجهاز اللوحي.
تطبيق أجار من طبقتين لاختبار النشاط المضاد للبكتيريا للمضادات الحيوية. يُسكب 20 مل من أجار (3٪) من البطاطس أو الملفوف أو أي نوع آخر ينمو عليه ميكروب الاختبار جيدًا في طبق بتري. هذه هي الطبقة الأولى. بعد ذلك ، عندما يصلب الأجار ، يُسكب عليه 5 مل من أجار آخر (1.5٪) ، ويضاف إليه معلق من البكتيريا بمعدل 1 مل من المعلق البكتيري لكل 100 مل من الوسط ، يحتوي على مليار خلية بكتيرية (طبقه ثانيه). بعد أن تصلب الطبقة الثانية ، تصنع الآبار بكمة ، يُسكب فيها المضاد الحيوي بالقطرات.
طريقة لتحديد العمل الجراثيم لتوليفات المضادات الحيوية. لدراسة حساسية البكتيريا لتوليفات المضادات الحيوية ، يتم استخدام طريقة أجار لنشر. لهذا الغرض ، تم استخدام شرائح ورقية مشربة بالمضادات الحيوية وتوضع على سطح الأجار بزاوية مع بعضها البعض. تم وصف النتائج التي تم الحصول عليها بيانياً باستخدام المنحنيات ، حيث تعبر أنواع معينة منها عن التأثير التآزري أو الكلي أو المضاد لمضاد حيويان.
تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية باستخدام مجهر طور التباين. تعتمد طريقة التحديد السريع لحساسية البكتيريا للمضادات الحيوية على مبدأ مراقبة البكتيريا الحية في مجهر تباين الطور. يتم تطبيق مزرعة الاختبار للبكتيريا على طبق بتري مع أجار استسقاء بنسبة 3 ٪. يتم وضع أربع أو خمس دوائر من ورق الترشيح المبلل بمضادات حيوية مختلفة على سطح الوسط. بعد 3-5 ساعات ، باستخدام مجهر تباين الطور ، يمكنك تحديد منطقة تثبيط نمو البكتيريا. في منطقة تثبيط النمو ، تم العثور على البكتيريا الفردية فقط ، بينما لوحظ تكوين مستعمرات نموذجية خارجها.
